2013年臨床助理醫(yī)師考試輔導(dǎo)：細菌的代謝產(chǎn)物

　　細菌分泌胞外酶將多糖、蛋白質(zhì)等大分子營養(yǎng)物質(zhì)分解為單糖、小肽或氨基酸，然后吸收進入菌體，再經(jīng)氧化或胞內(nèi)酶分解形成菌體可利用的成分，此謂細菌的分解代謝。細菌以營養(yǎng)原料及生物氧化產(chǎn)生的能量，合成菌體及相應(yīng)的代謝產(chǎn)的，此謂合成代謝。

　　細菌在分解和合成代謝中能產(chǎn)生多種代謝產(chǎn)物，在細菌的鑒定及生化反應(yīng)中有實際意義。

　　(一)分解代謝產(chǎn)物的檢測

　　細菌的分解代謝產(chǎn)物因各種細菌具備的酶不完全相同，而有所差異。各代謝產(chǎn)物可通過生化試驗的方法檢測，通常稱為細菌的生化的反應(yīng)。

　　1.糖代謝測定

　　(1)糖發(fā)酵試驗：細菌對各種糖的分解能力及代謝產(chǎn)物不同，可借以鑒別細菌。一般非致病菌能發(fā)酵多種單糖，如大腸桿菌能分解葡萄糖有乳糖，產(chǎn)生甲酸等產(chǎn)物，并有甲酸解氫酶，可將其分解為CO2和H2，故生化反應(yīng)結(jié)果為產(chǎn)酸產(chǎn)氣，以“⊕”表示。傷寒桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸，但無解氫酶。故生化結(jié)果為產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，以“+”表示。傷寒桿菌及一般致病菌大都不能分解乳糖，以“-”表示。

　　(2)VP試驗：大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖⊕，為區(qū)分兩菌可采用VP試驗及甲基紅試驗。產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫羧、氧化(在堿性溶液中)生成二乙酰，后者可與含胍基的化合物反應(yīng)，生成紅色化合物，稱VP陽性。大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，VP陰性。

　　(3)甲基紅試驗：產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后形成中性產(chǎn)物，培養(yǎng)液pH>5.4，甲基紅指示劑呈桔黃色，為甲基紅試驗陰性，大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，培養(yǎng)液呈酸性pH<5.4，指示劑甲基紅呈紅色，稱甲基紅試驗(Methyl red test,MR)陽性。

　　(4)枸櫞酸鹽利用試驗(Citrateultiliazation test):能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的細菌如產(chǎn)氣桿菌，分解枸櫞酸鹽生成碳酸鹽，同時分解培養(yǎng)基的銨鹽生成氨，由此使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，使指示劑溴麝香草酚藍(BTB)由淡綠轉(zhuǎn)為深藍，此為枸櫞酸鹽利用試驗陽性。、

　　2.蛋白質(zhì)代謝測定

　　(1)吲哚試驗(Indoltest)：含有色氨酸酶的細菌(如大腸桿菌、變形桿菌等)可分解色氨酸生成吲哚，若加入二甲基氨基苯甲醛，與吲哚結(jié)合，形成玫瑰吲哚，呈紅色，稱吲哚試驗陽性。

　　(2)硫化氫試驗：變形桿菌、乙型副傷寒桿菌等能分解含硫氨基酸如胱氨酸、甲硫氨酸等，生成硫化氫。在有醋酸鉛或硫酸亞鐵存在時，則生成黑色硫化鉛或硫化亞鐵，可借以鑒別細菌。

　　3.尿素分解試驗

　　變形桿菌具有尿素酶，可分解尿素產(chǎn)生氨，培養(yǎng)基呈堿性，以酚紅為指示劑檢測呈紅色，由此區(qū)別于沙門氏菌。

　　吲哚(I)、甲基紅(M)、VP(V)、枸櫞酸鹽利用(C)四種試驗，常用于鑒定腸道桿菌，合稱之為IMViC試驗。大腸桿菌呈“++--”，產(chǎn)氣桿菌為“--++”。

　　氣相、液相色譜法通過對細菌分解代謝產(chǎn)物中揮發(fā)性或不揮發(fā)性有機酸和醇類的檢測，可準(zhǔn)確、快速地確定細菌的種類，是目前進行細菌生化鑒定的高新技術(shù)。

　　(二)合成代謝產(chǎn)物及臨床意義

　　細菌通過新陳代謝不斷合成菌體成分，如多糖、蛋白質(zhì)、脂肪、核酸、細胞壁及各種輔酶等。此外，細菌還能合成很多在醫(yī)學(xué)上具有重要意義的代謝產(chǎn)物。

　　1.熱原質(zhì)(Pyrogen):熱原質(zhì)即菌體中的脂多糖，大多是革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的。注入人或動物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)，故名熱原質(zhì)。

　　熱原質(zhì)耐高熱，高壓蒸汽滅菌(121℃，20’)不能使其破壞，加熱(180℃4h;250℃45';650℃1')才使熱原質(zhì)失去作用。熱原質(zhì)可通過一般細菌濾器，但沒有揮發(fā)性，所以，除去熱原質(zhì)最好的方法是蒸餾。藥液、水等被細菌污染后，即使高壓滅菌或經(jīng)濾過除菌仍可有熱原質(zhì)存在，輸注機體后可引起嚴重發(fā)熱反應(yīng)。生物制品或注射液制成后除去熱原質(zhì)比較困難，所以，必須使用無熱原質(zhì)水制備。

　　2.毒素與酶：細菌可產(chǎn)生內(nèi)、外毒素及侵襲性酶，與細菌的致病性密切相關(guān)。

　　內(nèi)毒素(Endotoxin)即革蘭氏陰性菌細胞壁的脂多糖，其毒性成分為類脂A。菌體死亡崩解后釋放出來。外毒素(Exotoxin)是由革蘭氏陽性菌及少數(shù)革蘭氏陰性菌在生長代謝過程中釋放至菌體外的蛋白質(zhì)。具有抗原性強、毒性強、作用特異性強的突出特點。

　　某些細菌可產(chǎn)生具有侵襲性的酶，能損傷機體組織，促進細菌的侵襲、擴散，是細菌重要的致病因素，如鏈球菌的透明質(zhì)酸酶等。

　　3.色素(Pigment)：有些細菌能產(chǎn)生色素，對細菌的鑒別有一定意義。

　　細菌色素有兩類：①水溶性色素，能彌形至培養(yǎng)基或周圍組織，如綠膿桿菌產(chǎn)生的綠膿色素使培養(yǎng)基或膿汗呈綠色。②脂溶性色素，不溶于水，僅保持在菌落內(nèi)使之呈色而培養(yǎng)基顏色不變，如金黃色葡萄球菌色素。細菌色素的產(chǎn)生需一定條件(營養(yǎng)豐富、氧氣充足、溫度適宜)，無光合作用，對細菌的功能尚不清。

　　4.抗生素(Antibiotic):某些微生物代謝過程中可產(chǎn)生一種能抑制或殺死某些其他微生物或癌細胞的物質(zhì)，稱抗生素�？股�素多由放線菌和真菌產(chǎn)生，細菌僅產(chǎn)生少數(shù)幾種，如多粘菌素(Polymyxin)、桿菌肽(Bicitracin)等。

　　5.細菌素(Bactericin):某些細菌能產(chǎn)生一種僅作用于有近緣關(guān)系的細菌的抗菌物質(zhì)，稱細菌素。細菌素為蛋白類物質(zhì)，抗菌范圍很窄，無治療意義，但可用于細菌分型和流行病學(xué)調(diào)查。

　　細菌素以生產(chǎn)菌而命名。大腸桿菌產(chǎn)生的細菌素稱大腸菌素，綠膿桿菌產(chǎn)生的稱綠膿菌素，霍亂弧菌產(chǎn)生的稱弧菌素。