2012臨床助理微生物輔導(dǎo)：白喉的微生物學(xué)檢驗(yàn)

　　直接染色鏡檢

　　用棉拭采取假膜邊緣部滲出物，涂片，用奈瑟氏染色或美蘭染色，鏡檢有無含異染顆粒的棒狀桿菌。結(jié)合臨床癥狀，可作出初步診斷。確診必須通過細(xì)菌培養(yǎng)并進(jìn)行毒力試驗(yàn)。

　　凝固血清棉拭培養(yǎng)法

　　將沾有馬或牛血清的棉拭子放在無菌試管內(nèi)，經(jīng)8～10磅蒸氣滅菌20～30分鐘，并使血清凝固，且此凝固血清棉拭采取病人咽部標(biāo)本，置37℃培養(yǎng)8～10小時(shí)后，直接涂片鏡檢。此法可作為大量檢查時(shí)快速培養(yǎng)診斷之用。

　　培養(yǎng)檢查

　　將棉試檢材接種于雞蛋斜面或loeffer's血清凝固斜面培養(yǎng)基及亞碲酸鉀平板培養(yǎng)基上，置37℃培養(yǎng)，待斜面或平板上長出典型的灰色疑菌落，挑取轉(zhuǎn)種到雞蛋呀或血清斜面進(jìn)行分離培養(yǎng)，以供進(jìn)一步形態(tài)染色或毒力試驗(yàn)鑒定。

　　豚鼠試驗(yàn)

　　取體重250g豚鼠2只，其中一只試驗(yàn)前12小時(shí)，由腹腔注射白喉抗毒素250～500單位，供做對(duì)照。然后對(duì)照。然后各于皮下注射48小時(shí)的培養(yǎng)液2ml，若于2～4天注射抗毒素的豚鼠死亡，而對(duì)照豚鼠存活，便證明所試驗(yàn)菌株為有毒白喉?xiàng)U菌。

　　E平板試驗(yàn)

　　將浸有白喉抗毒素的無菌濾紙條貼在含20%馬血清的瓊脂平板上，然后沿濾紙條垂直方向劃線接種待測細(xì)菌，同時(shí)也接種已知產(chǎn)毒株和不產(chǎn)毒株做為對(duì)照。37℃培養(yǎng)48小時(shí)后，若待檢菌株產(chǎn)生白喉外毒素，則在濾紙條和劃線生長的菌苔交界外出現(xiàn)白色沉淀線。

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