復(fù)習(xí)總結(jié)：甾體激素類藥物

    ⑤溫度與時(shí)間的影響：一般室溫或30℃恒溫條件下顯色。中國(guó)藥典多數(shù)25℃暗處反應(yīng)40～45min. 4.異煙肼比色法甾體激素C3-酮基及某些其他位置上的酮基都能在酸性條件下與羰基試劑異煙肼縮合形成黃色異煙腙，在一定波長(zhǎng)下具有最大吸收。

    某些具有兩個(gè)酮基的甾體激素可形成雙腙，如黃體酮、可的松和氫化可的松等。

    本法主要用于甾體激素制劑的測(cè)定，如倍他米松軟膏、哈西奈德軟膏、倍他米松磷酸鈉及其注射液等的含量測(cè)定。

    討論：①溶劑的選擇：只用用無(wú)水乙醇和無(wú)水甲醇才能得到滿意的結(jié)果，其他溶劑因受到異煙肼鹽酸鹽在其中溶解度的限制不能采用。

    ②酸的種類和濃度以及異煙肼的濃度：當(dāng)酸與異煙肼試劑的摩爾比為2：1時(shí)可獲得最大吸收度。

    ③水分、溫度、光線和氧的影響：當(dāng)溶劑中含水量增高，吸收度隨之降低。溫度升高，反應(yīng)加速。當(dāng)在具塞玻管中不致使溶劑揮發(fā)及吸收水分的情況下，光與氧不影響反應(yīng)。

    ④關(guān)于反應(yīng)的專屬性：具有Δ4-3-酮基的甾體激素在室溫不到1h即可定量地與酸性異煙肼反應(yīng)。其他甾酮化合物需在長(zhǎng)時(shí)間放置或加熱后方可反應(yīng)完全，因此在上述反應(yīng)條件下，本法對(duì)Δ4-3-酮甾體具有一定的專屬性。

    5.Kober反應(yīng)比色法Kober反應(yīng)是指雌激素與硫酸-乙醇共熱呈色，用水或稀硫酸稀釋后重新加熱發(fā)生顏色改變，并在515nm附近有最大吸收。

    Kober反應(yīng)有兩步：①與硫酸-乙醇光熱產(chǎn)生黃色，在465nm處有最大吸收；②加水或稀硫酸稀釋，重新加熱顯桃紅色，在515nm處有最大吸收。

    中國(guó)藥典采用本法測(cè)定炔雌醇片及復(fù)方炔諾孕酮片、復(fù)方炔諾孕酮滴丸、復(fù)方左炔諾孕酮滴丸中的炔雌醇的含量。

    維生素類藥物維生素A維生素A的結(jié)構(gòu)為具有一個(gè)共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烯，因而具有許多立體異構(gòu)體。

    天然維生素A主要是全反式維生素A.性質(zhì)：具紫外吸收，易氧化變質(zhì)，能與三氯化銻呈色，與氯仿、乙醚、環(huán)己烷或是由醚任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。

    鑒別試驗(yàn)①三氯化銻反應(yīng)（Carr-price反應(yīng)）：維生素A在飽和無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇氯仿溶液中，即顯藍(lán)色，漸變成紫紅色。

    ②紫外吸收光譜：維生素A分子中含有5個(gè)共軛雙鍵，其無(wú)水乙醇溶液在波長(zhǎng)326nm處有最大吸收。當(dāng)在演算催化下加熱，則發(fā)生去水反應(yīng)而生成脫水維生素A.后者比維生素A多一個(gè)共軛雙鍵，使其最大吸收峰紅移，同時(shí)在350～390nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)出現(xiàn)3個(gè)最大吸收峰。

    ③薄層色譜：以硅膠G為吸附劑，環(huán)己烷-乙醚（80：20）為流動(dòng)相。

    含量測(cè)定：紫外分光光度法（三點(diǎn)校正法）

    原理：本法是在三個(gè)波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，根據(jù)校正公式計(jì)算吸收度A校正值后，再計(jì)算含量，故本法亦稱“三點(diǎn)校正法”。原理如下：

    ①雜質(zhì)的吸收在310～340nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)呈一條直線，且隨波長(zhǎng)的增大，吸收度變小。

    ②物質(zhì)對(duì)光的吸收具有加和性。

    三點(diǎn)波長(zhǎng)的選擇法①第1點(diǎn)：選擇維生素A的最大吸收波長(zhǎng)（即λ1）。

    ②第2點(diǎn)和第3點(diǎn)：在最大吸收波長(zhǎng)的兩側(cè)各選一點(diǎn)（即λ2和λ3）。

    等波長(zhǎng)差法：在λ1的左右各選一點(diǎn)為λ2和λ3，使λ3—λ1＝λ1—λ2.維生素A醋酸酯。

    等吸收法：在λ1的左右各選一點(diǎn)為λ2和λ3，使Aλ2= Aλ3=6/7 Aλ1.維生素A醇。

    ③雜質(zhì)吸收：對(duì)維生素A的測(cè)定有影響的雜質(zhì)主要有：

    維生素A2和維生素A3；維生素A的氧化產(chǎn)物（環(huán)氧化物、維生素A醛和維生素A酸）；維生素A在光照下產(chǎn)生的無(wú)生物活性的聚合物鯨醇；維生素A