A:苷元相同時(shí),以含水移動(dòng)相洗脫,被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋?苷元>單糖苷>雙糖苷>雙糖鍵苷。
B:與酚羥基的數(shù)目有關(guān),數(shù)目越多,吸附力越強(qiáng)。與酚羥基的位置有關(guān),如果酚羥基所處的位置易形成分子內(nèi)氫鍵,則吸附力減弱。
查耳酮>二氫黃酮, 黃酮>二氫黃酮
C:不同類型黃酮類化合物,被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋狐S酮醇>黃酮>二氫黃酮>異黃酮。
D:分子內(nèi)芳香化程度越高,共軛雙鍵越多,則吸附力越強(qiáng)。
3、葡聚糖凝膠色譜法
凝膠類型:Ssephadex LH-20和Sephadex G兩種類型的凝膠。
分離苷元時(shí):利用吸附作用,游離酚羥基數(shù)目越多,則吸附力越強(qiáng),越難洗脫。
分離苷時(shí):主要靠分子篩,洗脫時(shí)按苷分子量由大到小的順序依次被洗脫出柱體。
黃酮類化合物 取代基 Ve/Vo
芹菜素 5,7,4‘-三羥基 5.3
木犀草素 5,7,3‘,4’-四羥基 6.3
槲皮素 3,5,7,3',4'-五羥基 8.3
楊梅素 3,5,7,3‘,4’,5‘-六羥基 9.2
山柰酚-3-鼠李糖基 三糖苷 3.3
半乳糖-7-鼠李糖苷
槲皮素-3-蕓香糖苷 雙糖苷 4.0
槲皮素-3-鼠李糖苷 單糖苷 4.9
常用的洗脫劑:堿性水溶液,含鹽水溶液、醇及含水醇
(二)PH梯度法:用不同濃度的堿分離
(三)硼酸絡(luò)合法 具有鄰二酚羥基的黃酮類化合物可與硼酸絡(luò)合生成易溶于 水的化合物。
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