2014初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo)：?jiǎn)蜗驍U(kuò)散試驗(yàn)

　　單向擴(kuò)散試驗(yàn)：瓊脂內(nèi)混入抗體，待測(cè)抗原從局部向瓊脂內(nèi)自由擴(kuò)散，如抗原和相應(yīng)抗體結(jié)合，則形成沉淀環(huán)。

　　1、試管法：將一定量的抗體混入0.7%瓊脂糖溶液中，注入小試管內(nèi)，上層加抗原溶液使待測(cè)抗原在凝膠中自由擴(kuò)散，在抗原抗體比例恰當(dāng)位置形成沉淀環(huán)。

　　2、平板法：是將抗體或抗血清混入0.9%瓊脂糖內(nèi)，未凝固前傾注成平板，然后在上打孔，將抗原加入孔中，放37℃讓其自由擴(kuò)散，24～48h后可見(jiàn)孔周圍出現(xiàn)沉淀環(huán)，測(cè)定環(huán)的直徑或面積計(jì)算標(biāo)本中待測(cè)抗原的濃度。有兩種計(jì)算方法：l)Mancini曲線：適用大分子抗原的和長(zhǎng)時(shí)間擴(kuò)散(>48h)的結(jié)果，沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關(guān)系c/d2=k.(其中c為抗原濃度d為沉淀環(huán)直徑k為常數(shù))

　　3、單向擴(kuò)散試驗(yàn)檢測(cè)時(shí)的注意點(diǎn)：

　　(1)抗血清必須特異性強(qiáng)、效價(jià)高、親和力強(qiáng)，在良好條件下保存。

　　(2)每次測(cè)定都必須作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　(3)每次測(cè)定時(shí)必須用質(zhì)控血清作質(zhì)控。

　　(4)注意雙環(huán)現(xiàn)象(出現(xiàn)了兩種抗原性相同成分)。

　　(5)應(yīng)用單克隆抗體測(cè)量多態(tài)性抗原時(shí)，測(cè)定值偏低;用多克隆抗體測(cè)量單克隆病時(shí)，測(cè)定值偏高。

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