散射比濁法是指一定波長的光沿水平軸照射,通過溶液使遇到抗原抗體復(fù)合物粒子,光線被粒子顆粒折射,發(fā)生偏轉(zhuǎn),光線偏轉(zhuǎn)的角度與發(fā)射光的波長和抗原抗體復(fù)合物顆粒大小和多少密切相關(guān)。散射光的強度與復(fù)合物的含量成正比,即待測抗原越多,形成的復(fù)合物也越多,散射光也越強。散射光的強度還與各種物理因素,如加入抗原或抗體的時間、光源的強弱和波長、測量角度等密切相關(guān)。
(一)散射顆粒與散射光
懸浮在反應(yīng)溶液中的分子,無論是固體或膠體粒子都可以是散射中心,當入射光通過時,如果顆粒直徑比入射光的波長小很多,則散射光的分布比較均勻,稱為Rayleigh散射。如果顆粒直徑接近于入射光的波長,則散射光的分布明顯不均勻,稱為Mile散射。
(二)反應(yīng)物含量與散射濁度
抗原抗體結(jié)合反應(yīng)中,遵守典型的Heidelberger曲線,即當抗體量恒定時,抗原與抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物的反應(yīng)與散射信號響應(yīng)值的上升呈正比。
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