2013免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：斑點(diǎn)免疫層析試驗(yàn)

　　(一)原理

　　斑點(diǎn)免疫層析試驗(yàn)(dotimmunochromatographicassay，DICA)簡(jiǎn)稱(chēng)免疫層析試驗(yàn)(ICA)，也以硝酸纖維素膜為載體，但利用了微孔膜的毛細(xì)血管作用，滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移，猶如層析一般。

　　(二)試劑和操作

　　免疫層析試驗(yàn)以單克隆雙抗體夾心法為例。試驗(yàn)所用試劑全部為干試劑，多個(gè)試劑被組合在一個(gè)約6mm×70mm的塑料板條上，成為一單一試劑條，試劑條上端(A)和下端(B)分別粘貼吸水材料，免疫金復(fù)合物干片粘貼在近下端(C)處，緊貼其上為硝酸纖維素膜條。硝酸纖維素膜條上有兩個(gè)反應(yīng)區(qū)域，測(cè)試區(qū)(T)包被有特異抗體，參照區(qū)(R)包被有抗小鼠IgG。

　　測(cè)定時(shí)將試紙條下端浸入液體標(biāo)本中，下端吸水材料即吸取液體向上端移動(dòng)，流經(jīng)C處時(shí)使干片上的免疫金復(fù)合物復(fù)溶，并帶動(dòng)其向膜條滲移。若標(biāo)本中有待測(cè)特異抗原，其時(shí)可與免疫金復(fù)合物之抗體結(jié)合，此抗原抗體復(fù)合物流至測(cè)試區(qū)即被固相抗體所獲，在膜上顯出紅色反應(yīng)線條(T)。過(guò)剩的免疫金復(fù)合物繼續(xù)前行，至參照區(qū)與固相小鼠IgG結(jié)合(免疫金復(fù)合物中的單克隆抗體為小鼠IgG)，而顯出紅色質(zhì)控線條(R)。反之，陰性標(biāo)本則無(wú)反應(yīng)線條，而僅顯示質(zhì)控線條。

　　斑點(diǎn)免疫層析試驗(yàn)在試劑形式和操作步驟上較前述的幾種免疫測(cè)定法都更為簡(jiǎn)化，只用一個(gè)試劑，只有一步操作。