2013醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)輔導(dǎo)：酶免疫技術(shù)的分類(lèi)

　　酶免疫技術(shù)一般分成酶免疫組化技術(shù)和酶免疫測(cè)定兩大類(lèi)。酶免疫組化技術(shù)與熒光抗體技術(shù)相似，酶標(biāo)記抗體與組織切片上的抗原起反應(yīng)，然后與酶底物作用，形成有色沉淀物，可以在普通光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察。如酶作用的產(chǎn)物電子密度發(fā)生一定的改變，則可用電子顯微鏡觀(guān)察，稱(chēng)為酶免疫電鏡技術(shù)。

　　酶免疫測(cè)定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)記物而分為均相(homogenous)和異相(heterogenous)兩種類(lèi)型，實(shí)際上所有的標(biāo)記免疫測(cè)定均可分成這兩類(lèi)。如以標(biāo)記抗體檢測(cè)標(biāo)本中的抗原為例，按照簡(jiǎn)單的形式是在試劑抗體過(guò)量的情況下進(jìn)行，其反應(yīng)式如下：

　　Ab*+Ag→Ab*Ag+Ab*

　　Ab*Ag代表結(jié)合的標(biāo)記物，Ab*為游離的標(biāo)記物。如在抗原反應(yīng)后，先把Ab*Ag與Ab*分離，然后測(cè)定Ab*Ag或Ab*中的標(biāo)記物的量，從而推算出標(biāo)本中的抗原量，這種方法稱(chēng)為異相法。如在抗原抗體反應(yīng)后Ab*Ag中的標(biāo)記物*失去其特性，例如酶失去其活力，熒光物質(zhì)不顯熒光，則不需要進(jìn)行Ab*Ag與Ab*的分離，可以直接測(cè)定游離的Ab*量，從而推算出標(biāo)本中的Ag含量，這種方法稱(chēng)為均相法。

　　在異相法中，抗原和抗體如在液體中反應(yīng)，分離游離和結(jié)合的標(biāo)記物的方法有好多種。與放射免疫測(cè)定相類(lèi)似的液相異相酶免疫技測(cè)定，在某些激素等定量測(cè)定中也有應(yīng)用。但常用的酶免疫測(cè)定法為固相酶免疫測(cè)定。其特點(diǎn)是將抗原或抗體制成固相制劑，這樣在與標(biāo)本中抗體或抗原反應(yīng)后，只需經(jīng)過(guò)固相的洗滌，就可以達(dá)到抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)的分離，大大簡(jiǎn)化了操作步驟。這種被稱(chēng)為ELISA的檢測(cè)技術(shù)成為目前臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣的免疫測(cè)定方法。