初級(jí)藥士/藥師考試輔導(dǎo):基因的轉(zhuǎn)化
轉(zhuǎn)化是受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段,通過(guò)與染色體重組,獲得了供體菌的部分遺傳特性。轉(zhuǎn)化的DNA可以是細(xì)菌溶解后釋放的,也可用人工方法抽提而獲得。
轉(zhuǎn)化首先在1928年由Griffith在肺炎球菌中發(fā)現(xiàn),以后在葡萄球菌、嗜血桿菌也先后被發(fā)現(xiàn)。Griffith 的實(shí)驗(yàn)為:以無(wú)毒的Ⅱ型粗糙型(無(wú)莢膜)肺炎球菌注入小白鼠,并不引起動(dòng)物死亡;以有毒力的Ⅲ型光滑型(有莢膜)肺
圖5-4 細(xì)菌間的基因轉(zhuǎn)移、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合
炎球菌注入小白鼠后,動(dòng)物則死于全身性感染,以加熱殺死的Ⅲ型光滑型肺炎雙球菌注入小白鼠后,動(dòng)物不死亡,亦分離不到Ⅲ型光滑型肺炎雙球菌。如果將活的Ⅱ型粗糙型肺炎球菌與殺死的Ⅲ型光滑型肺炎球菌混合后注入小白鼠,結(jié)果動(dòng)物發(fā)生全身性感染而死亡,自動(dòng)物體內(nèi)可分離到活的Ⅲ型光滑型肺炎球菌。以后直到1944年Avery才證實(shí)轉(zhuǎn)化的物質(zhì)是DNA,因可被DNA酶所破壞。以后的試管內(nèi)培養(yǎng)條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)細(xì)菌在攝取外源DNA時(shí),需處于感受態(tài)(Competence)。肺炎球菌的感受態(tài)是在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期,約持續(xù)40分鐘。進(jìn)入受體菌的DNA片段需有與受體菌染色體上的同源核酸片段才能發(fā)生重組。當(dāng)上述實(shí)驗(yàn)中Ⅲ型光滑型肺炎球菌產(chǎn)生莢膜的DNA片段與Ⅱ型粗糙型肺炎球菌的染色體DNA發(fā)生重組后,后者即可分裂產(chǎn)生具有Ⅲ型莢膜的光滑型有毒力的肺炎球菌子代。在自然條件下細(xì)菌通過(guò)轉(zhuǎn)化獲得外源性DNA發(fā)生遺傳型變異的機(jī)會(huì)是存在的,但不一定多見(jiàn)。
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