2014執(zhí)業(yè)藥師《藥物分析》章節(jié)復習:第五章

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第五章 分光光度法

　　第一節(jié) 紫外—可見分光光度法

　　一、基本原理

　　紫外—可見吸收光譜屬分子吸收光譜，是由分子的外層價電子躍遷產生的。

　　Lambert-Beer定律 A=ECL

　　A為吸收度，E為吸收系數，C為被測物質溶液濃度，L為光路長度。吸收系數E是物質的物理常數，隨濃度C單位的不同有不同表示方法。

　　藥品檢驗中使用百分吸收系數 ，物理意義是當吸光物質溶液濃度為1%(1g/100 ml)，液層厚度為1cm時的吸收度。

　　二、可見-紫外分光光度計

　　光源-單色器-吸收池-檢測器-數據記錄和處理

　　1.光源：紫外區(qū)采用氫燈或氘燈，可見光區(qū)采用鎢燈

　　2.單色器：狹縫寬度大，單色光純度差;寬度過小，檢測靈敏度降低

　　3.吸收池：玻璃池適用于370nm以上的可見光區(qū)，石英池適用于紫外、可見光區(qū)，通常僅在紫外光區(qū)使用

　　三、吸收度的測定方法

　　1.對溶劑的要求：能充分溶解樣品，與樣品無相互作用，揮發(fā)性小，在測定波長處的吸收應符合要求

　　2.空白對照實驗：將溶劑裝入參比池，調節(jié)吸收度為0，去除溶劑和容器吸收、光散射、反射的影響。

　　3.測定波長確證

　　4.供試品溶液濃度：使吸收度在0.3～0.7范圍內。

　　5.狹縫寬度：以減少狹縫寬度時，供試品溶液吸收度不再增加為準。

　　四、應用

　　1.鑒別

　　(1) 對比吸收光譜特征參數：核對供試品溶液λmax、 、A是否符合規(guī)定�？赏瑫r用幾個峰位作為鑒別依據

　　(2) 比較吸收度比值一致性：吸收峰較多時，規(guī)定幾個波長處吸收度比值作為鑒定標準

　　(3) 對比吸收光譜一致性

　　2.雜質檢查

　　藥物在紫外-可見光區(qū)有明顯吸收，而雜質吸收弱;或雜質有明顯吸收而藥物無吸收，可通過控制吸收度限度來控制雜質量。

　　3.含量測定

　　(1) 對照品比較法：供試品溶液和對照品溶液濃度及測定條件應盡可能一致

　　(2) 吸收系數法：需對儀器進行嚴格校正和檢定

　　(3) 計算分光光度法：通過數學處理消除樣品中干擾組分的干擾

　　(4) 比色法：供試品與對照品同時操作

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