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2010執(zhí)業(yè)藥師考試藥學專業(yè)知識(一)復習要點(12)

  三、液固吸附色譜法 LSC

  l 分離原理:按被分離組分的分子(溶質(zhì)分子)與流動相分子(溶劑分子)爭奪吸附劑表面活性中心的吸附能力的差別而分離。

  l 硅膠為吸附色譜法最常用的固定相。

  四、液液分配色譜法 LLC

  (一)正相分配色譜法:流動相極性<固定相極性。

  主要用于分離溶于有機溶劑的極性及中等極性的分子型物質(zhì)。

  反相分配色譜法:流動相極性>固定相極性。主要用于分離非極性至中等極性物質(zhì)。

  (二)LLC的固定相 最常用的固定相是化學健合相。

  (1)非極性健合相:十八烷基硅烷健合硅膠(ODS,C18)、辛基硅烷健合硅膠(C8),在反相HPLC中最為常用。

  (2)極性健合相:常用氨基和氰基硅烷鍵合相,即可用于正相色譜法,也可用于反相色譜法。多用于正相HPLC。

  ★★五、色譜系統(tǒng)適用性試驗

  目的:檢查色譜系統(tǒng)在實驗條件影響下是否符合要求

  在各品種項下規(guī)定的色譜條件下,除固定相種類、流動相組成、檢測器類型不得改變外,其余如色譜柱內(nèi)徑、色譜柱長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組成的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等,均可適當改變。以適應具體的色譜系統(tǒng)并達到色譜系統(tǒng)適用性試驗的要求。

  一、系統(tǒng)適用性試驗

  色譜系統(tǒng)適用性試驗通常包括:理論踏板數(shù)、分離度、重復性和拖尾因子等四個指標。

  (1)色譜柱的理論踏板數(shù)(n) n=5.54 (tR /Wh/2)2 tR, Wh/2統(tǒng)一單位

  如測得n低于規(guī)定,應改變柱長或載體性能、重填色譜柱等以求達到。

  (2)分離度 (R) R=2(tR2-tR1)/(W1+W2) 定量分析時R ³ 1.5

  記錄紙速:轉(zhuǎn)換分子、分母單位相同的參數(shù)。

  考題 A型題:

  測得兩色譜峰的保留時間tR1=6.5min,tR2=8.3min,峰寬W1=1.0min,W2=1.4min,則兩峰分離度R為

  A、0.22

  B、1.2

  C、2.5

  D、0.75

  ÖE、1.5

  (3)重復性:

  ①對照品溶液連續(xù)進樣5次,其峰面積測量值的 RSD ≤2.0%

 、谂渲葡喈斢80%、100%和120%的對照品溶液,加規(guī)定量的內(nèi)標溶液,配成三種不同濃度的溶液,分別至少進樣2次,計算平均校正因子,其RSD ≤2.0%

  (4)拖尾因子(T): T = W0.05h/2d1 T應在0.95 ~ 1.05之間

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