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2010執(zhí)業(yè)藥師考試藥學(xué)專業(yè)知識(一)復(fù)習(xí)要點(10)

  ★二、紫外-可見分光光度計

  (一)基本結(jié)構(gòu):


  光源 紫外:氘燈或氫燈;可見: 鎢燈或鹵鎢燈

  單色器 色散元件(光柵或棱鏡);狹縫

  吸收池 紫外: 石英; 可見: 玻璃, 石英

  檢測器 光電池、光電管、光電倍增管、光二極管陣列檢測器

  數(shù)據(jù)記錄和處理

  (二)儀器的校正和檢定

  (1) 波長的校正 汞燈或氘燈的特定譜線為參照或鈥玻璃的特定波長

  (2)吸光度的準確度檢定 用重鉻酸鉀的硫酸溶液

  (3)雜散光的檢查 一般來源于光學(xué)儀器表面的瑕疵

  三、 吸光度的測定要求

  1. 溶劑 應(yīng)符合規(guī)定

  2. 作空白試驗校正 目的:消除溶劑和吸收池的影響

  3. 測定波長的檢查 一般以吸光度最大的波長 max為測定波長,吸收峰的波長應(yīng)在該品種規(guī)定波長的±2%以內(nèi),否則應(yīng)考慮供試品的真?zhèn)巍⒓兌燃皟x器波長正確性。

  影響波長檢查結(jié)果的條件有:供試品的真?zhèn)闻c純度、溶劑的種類 、儀器波長的正確性

  4. 供試品溶液濃度 使吸光度在0.3-0.7范圍內(nèi)

  5. 儀器狹縫寬度的選擇 調(diào)至供試品溶液的吸光度不再增加為止

  ♣♣四、應(yīng)用

  (一)鑒別 《中國藥典》所采用方法:

  1. 核對吸收光譜的特征參數(shù):最大吸收波長lmax,吸收系數(shù)E1%1cm;吸光度 A

  2. 比較吸光度比值: Al1 /Al2®El1/El2

  3. 比較吸收光譜的一致性

  (二)雜質(zhì)檢查:

  依據(jù):藥物與雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不同,故吸收光譜也不同。

  1. 藥物在紫外可見光區(qū)沒有明顯吸收,所含雜質(zhì)有較強吸收¾¾少量雜質(zhì)可用光譜檢索出來。

  2. 藥物有較強吸收;雜質(zhì)無吸收或很弱¾E(e)¯ 或雜質(zhì)有更強吸收¾¾ E(e)­

  規(guī)定吸光度的上下限可在一定程度上控制雜質(zhì)的量

  (三)含量測定:

  紫外分光光度法用于含量測定的方法有三種:前三種方法

  (1)對照品比較法:

   AR/AX=ECRL / ECXL =CR/ CX Þ CX=(AX/AR)CR

  供試品溶液與對照品溶液濃度C及測定條件應(yīng)一致,E、L相等

  (2)吸收系數(shù)法(絕對法):

  ♣♣♣♣ A=E1%1cm CL ÞC=A/(E1%1cmL)

  對儀器須進行嚴格的校正和檢定(波長的準確度、狹縫寬度符合要求),否則影響準確度

  (3)計算分光光度法 如雙波長分光光度法、導(dǎo)數(shù)光普法

  主要用于消除樣品中干擾組分的干擾

  (4)比色法(屬于可見分光光度法) 顯色劑顯色后測定

  §2. 熒光分析法

  一、基本原理

  (一)熒光的產(chǎn)生:某些物質(zhì)受紫外光或可見光照射激發(fā)后,能發(fā)射出比激發(fā)光波長更長的熒光;除去激發(fā)光源,熒光立即熄滅。

  熒光的能量小于激發(fā)光的能量,波長則長于激發(fā)光。

  (二)熒光光譜

  熒光激發(fā)光譜¾¾熒光的激發(fā)光波長為橫坐標;發(fā)射光強度為縱坐標

  熒光發(fā)射光譜¾¾激發(fā)光波長和強度不變,熒光物質(zhì)的不同熒光波長為橫坐標;發(fā)射光強度為縱坐標

  激發(fā)光波長、強度不變,測定用溶劑、溫度等條件一定時,熒光強度與物質(zhì)濃度成正比——定量依據(jù)。

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