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2006年全國(guó)執(zhí)業(yè)藥師知識(shí)必備:藥物分析輔導(dǎo)(二)


龍膽瀉肝丸含量測(cè)定方法
  龍膽瀉肝丸處方為:龍膽120g,柴胡120g,黃芩60g,梔子(炒)60g,澤瀉120g,木通60g,車前子(鹽炒)60g,當(dāng)歸(酒炒)60g,地黃120g,炙甘草60g。
     2005《中國(guó)藥典》龍膽瀉肝丸含量測(cè)定項(xiàng)下:
     色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(23:77)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm,柱溫40℃。理論板數(shù)按龍膽苦苷峰計(jì)應(yīng)不低于2500。
     供試品溶液的制備:取本品,研細(xì),取約1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)45分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
     文獻(xiàn)報(bào)道的方法,以黃芩苷為指標(biāo)的,常用的實(shí)驗(yàn)條件如:李楚云等用HPLC法測(cè)定龍膽瀉肝丸中黃芩苷的含量,采用Waters 515高效液相色譜儀,色譜柱為Nova-Pak C18 (3.9mm×150mm,4μm),流動(dòng)相為甲醇-水-冰醋酸(50:50 :1),流速1.0ml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)279nm。樣品用50%甲醇超聲提取,結(jié)果黃芩苷在1.60~7.60μg/ml 范圍內(nèi)線性良好,平均回收率為99.0%,RSD為2.2%。
     丘桂賢等用HPLC法測(cè)定龍膽瀉肝丸中黃芩苷的含量,采用LC-10AD高效液相色譜儀,色譜柱為Shimpack C18(6.0mm×150mm),流動(dòng)相為磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88,加水溶解成
1000ml,并以80%磷酸調(diào)節(jié)pH為3.0)-甲醇(40:60),流速1.00ml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)279nm。
     顏耀東等用聚酰胺薄層掃描法測(cè)定龍膽瀉肝丸中黃芩苷的含量,聚酰胺用85%甲酸和70%乙醇處理,展開(kāi)劑為36%醋酸-水(10:0.9)。Λs=280nm,λR=210nm。
     黃淑彰等用紫外分光光度法測(cè)定龍膽瀉肝丸中黃芩苷的含量,測(cè)定吸收波長(zhǎng)為277nm。
     以龍膽苦苷為指標(biāo)的,如:許軍等用HPLC光電二極管矩陣檢測(cè)器測(cè)定龍膽瀉肝丸中龍膽苦苷的含量,采用Waters高效液相色譜儀,YWG C18柱,流動(dòng)相為甲醇-水-乙腈(1:4:2),檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。
      另外還有以馬兜鈴酸和梔子苷為指標(biāo)的,如:付桂香等用薄層掃描法測(cè)定龍膽瀉肝丸中馬兜鈴酸的含量,薄層板為Silica gel 60 F254預(yù)制板,苯-甲醇-36%醋酸(17:2:0.2)為展開(kāi)劑。雙波長(zhǎng)反射法鋸齒掃描,λS=395nm,λR=500nm。李紅霞用RP- HPLC法測(cè)定龍膽瀉肝丸中梔子苷的含量,色譜柱為Shimadzu ODS 柱(150mm×4.6mmID,5μm),流動(dòng)相為異丙醇-醋酸乙酯-水(1:0.8:92.2),流速1.5ml/min,柱溫40℃。

四神丸含量測(cè)定方法
  四神丸處方為:肉豆蔻200g,補(bǔ)骨酯(鹽炒)400g,五味子(醋制)200g,吳茱萸(制)100g,大棗(去核)200g。
     2005《中國(guó)藥典》四神丸含量測(cè)定項(xiàng)下:
     色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-水(30:70)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為245nm。理論板數(shù)按補(bǔ)骨酯素峰計(jì)應(yīng)不低于6000。
     供試品溶液的制備:取本品,研細(xì),取1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入70%甲醇100ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率300W,頻率33kHz)20分鐘,放冷,再稱定重量,用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
     文獻(xiàn)報(bào)道的常用方法現(xiàn)介紹如下:
     田玉先等HPLC法測(cè)定四神丸中五味子乙素的含量,色譜柱為C18柱(4.6×200mm,5μm),流動(dòng)相為甲醇-四氫呋喃-水(64:4:32),檢測(cè)波長(zhǎng)254nm。樣品用正己烷索氏回流提取。
     陳偉等用SFE-CGC法測(cè)定四神丸中補(bǔ)骨酯素和異補(bǔ)骨酯素的含量,樣品用SFE法處理,采用含5%苯基硅氧烷交聯(lián)毛細(xì)管柱,蒽為內(nèi)標(biāo)液。氣化溫度250,檢測(cè)溫度280,柱溫210,載氣N2,柱頭壓55kPa,分流比50:1。
      甄攀等用HPLC法測(cè)定四神丸中吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量,色譜柱為YWG-C18 (250mm×4.6mm, 10μm),流動(dòng)相為水-甲醇-乙腈梯度洗脫:0-15min,水-甲醇-乙腈(40:30:30);15-27min,乙腈-水(70:30); 27min以后,水-甲醇-乙腈(40:30:30)。柱溫30℃,檢測(cè)波長(zhǎng)225nm。
     譚生建等梯度洗脫變換波長(zhǎng)HPLC測(cè)定四神丸中補(bǔ)骨酯素、異補(bǔ)骨酯素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量。以乙醇為溶劑,水浴回流提取。色譜柱為L(zhǎng)UNA C18分析柱 (4.6mm ×250mm,粒徑5μm),ODS保護(hù)柱(5mm×50mm,粒徑5μm),柱溫36℃,流動(dòng)相甲醇(A泵)和水(B泵),流速0.8ml/min。流動(dòng)相洗脫及檢測(cè)波長(zhǎng)變換程序:0.01min,λ296nm,B泵40%,14 min,B泵40%,16min,B泵28%,28min,290nm,38min,λ360nm,45min,B泵28%。

 

 


 

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