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| 第 2 頁(yè)：答案 |
一、A1
1、
【正確答案】 A
【答案解析】 TMB是一種優(yōu)于OPD的新型HRP色原底物。TMB經(jīng)HRP作用后變?yōu)樗{(lán)色，加入硫酸終止反應(yīng)后變?yōu)辄S色，最大吸收峰波長(zhǎng)為450nm。
2、
【正確答案】 B
【答案解析】 TMB是一種優(yōu)于OPD的新型HRP色原底物。TMB經(jīng)HRP作用后變?yōu)樗{(lán)色，加入硫酸終止反應(yīng)后變?yōu)辄S色，最大吸收峰波長(zhǎng)為450nm。
3、
【正確答案】 B
【答案解析】 用于酶免疫技術(shù)的HRP，其RZ值應(yīng)大于3.0。
4、
【正確答案】 D
【答案解析】 酶免疫技術(shù)是將抗原抗體反應(yīng)的特異性和酶高效催化反應(yīng)的專一性相結(jié)合的一種免疫檢測(cè)技術(shù)。它是將酶與抗體或抗原結(jié)合成酶標(biāo)記抗體或抗原，此結(jié)合物既保留了抗體或抗原的免疫學(xué)活性，同時(shí)又保留了酶對(duì)底物的催化活性。
5、
【正確答案】 E
【答案解析】 OPD被認(rèn)為是HRP最為敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下顯橙黃色，加強(qiáng)酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng)后呈棕黃色，最大吸收峰在492nm波長(zhǎng)。
6、
【正確答案】 A
【答案解析】 戊二醛交聯(lián)法，戊二醛是一種雙功能團(tuán)試劑，可以使酶與蛋白質(zhì)或其他抗原的氨基通過(guò)它而偶聯(lián)。戊二醛交聯(lián)可用一步法(如連接AP)，也可用二步法(如連接HRP)。制備辣根過(guò)氧化酶(HRP)抗體結(jié)合物可用二步法。
7、
【正確答案】 A
【答案解析】 制備酶標(biāo)記物的抗原要求純度高，抗原性完整。
8、
【正確答案】 E
【答案解析】 用于標(biāo)記的酶應(yīng)符合下列要求：①酶的活性要強(qiáng)，催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高，純度高。②易與抗體或抗原偶聯(lián)，標(biāo)記后酶活性保持穩(wěn)定，且不影響標(biāo)記抗原與抗體的免疫反應(yīng)性。③作用專一性強(qiáng)，酶活性不受樣品中其他成分的影響，受檢組織或體液中不存在與標(biāo)記酶相同的內(nèi)源性酶或抑制物。用于均相酶免疫測(cè)定的酶還要求當(dāng)抗體與酶標(biāo)抗原結(jié)合后，酶活性可出現(xiàn)抑制或激活。④酶催化底物后產(chǎn)生的產(chǎn)物易于判斷或測(cè)量，方法簡(jiǎn)單易行、敏感和重復(fù)性好。⑤酶、輔助因子及其底物對(duì)人體無(wú)害，酶的底物易于配制、保存，酶及其底物應(yīng)價(jià)廉易得。
9、
【正確答案】 A
【答案解析】 酶免疫測(cè)定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)記物而分為均相和異相這兩類。
10、
【正確答案】 A
【答案解析】 鄰苯二胺(OPD)被認(rèn)為是HRP最為敏感的色原底物之一。
11、
【正確答案】 C
【答案解析】 雙抗原價(jià)心法是檢測(cè)抗體的方法，其操作步驟如下：①將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原，洗滌。②加稀釋的受檢血清。③加酶標(biāo)抗抗體。④加底物顯色。由此可知固相載體包被物是未標(biāo)記的已知抗原。
12、
【正確答案】 B
【答案解析】 在ELISA一步法測(cè)定中，應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)(hook effect)。當(dāng)標(biāo)本中待測(cè)抗原濃度相當(dāng)高時(shí)，過(guò)量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成夾心復(fù)合物，所得結(jié)果將低于實(shí)際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
13、
【正確答案】 B
【答案解析】 可做固相載體的物質(zhì)很多，最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保留原來(lái)的免疫活性。聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式，在測(cè)定過(guò)程中，它作為載體和容器，不參與化學(xué)反應(yīng)，加之它的價(jià)格低廉，所以被普遍采用。
14、
【正確答案】 C
【答案解析】 ELISA法對(duì)于只有單個(gè)抗原決定簇的小分子，則使用競(jìng)爭(zhēng)抑制法。
15、
【正確答案】 B
【答案解析】 ELISA法中雙抗體夾心法的固相載體包被物是未標(biāo)記的抗待測(cè)抗原的抗體。
16、
【正確答案】 B
【答案解析】 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)屬固相酶免疫測(cè)定方法，其基本原理為在固相載體上包被抗原或抗體后，通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使酶標(biāo)抗體(或酶標(biāo)抗原)結(jié)合到載體上，經(jīng)洗滌使結(jié)合的酶標(biāo)抗體和游離的酶標(biāo)抗體分離，洗去游離的酶標(biāo)抗體(或酶標(biāo)抗原)，加入底物顯色，根據(jù)顏色深淺進(jìn)行定性或定量分析。由原理可知，洗滌不是ELISA的反應(yīng)過(guò)程，但直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
17、
【正確答案】 E
【答案解析】 ELISA中最常用的酶是辣根過(guò)氧化物酶和堿性磷酸酶。
18、
【正確答案】 B
【答案解析】 競(jìng)爭(zhēng)法可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。以測(cè)定抗原為例，受檢抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合。
19、
【正確答案】 C
【答案解析】 酶結(jié)合物是指用酶標(biāo)記后的抗原或抗體。
20、
【正確答案】 E
【答案解析】 酶促反應(yīng)中需要最適pH、溫度及過(guò)量的底物，反應(yīng)速度可用一定時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物生成量或底物消耗量來(lái)反映。
21、
【正確答案】 E
【答案解析】 C表示濃度。
22、
【正確答案】 C
【答案解析】 酶免疫技術(shù)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
二、B
1、
【正確答案】 A
【答案解析】 目前抗可提取性核抗原(ENA)抗體的檢測(cè)方法有雙向免疫擴(kuò)散、對(duì)流免疫電泳和免疫印跡法。
【正確答案】 E
【答案解析】 熒光免疫技術(shù)是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種。
【正確答案】 B
【答案解析】 雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原最常用的方法。
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