| 第 1 頁(yè)：試題 |
| 第 2 頁(yè)：答案 |
一、A1
1、
【正確答案】 C
【答案解析】 熒光抗體技術(shù)包括標(biāo)本制作、熒光抗體制備、熒光抗體染色和熒光顯微鏡檢查等內(nèi)容。
2、
【正確答案】 A
【答案解析】 熒光效率的決定因素是熒光素本身特性。
3、
【正確答案】 A
【答案解析】 光照發(fā)光是指發(fā)光劑(熒光素)經(jīng)短波長(zhǎng)的入射光照射后，電子吸收能量躍遷到激發(fā)態(tài)，在其回復(fù)至基態(tài)時(shí)，發(fā)射出較長(zhǎng)波長(zhǎng)的可見(jiàn)光(熒光)。
4、
【正確答案】 D
【答案解析】 抗體標(biāo)記完成后，還應(yīng)對(duì)標(biāo)記抗體作進(jìn)一步純化，以去除未結(jié)合的游離的熒光素，純化方法可采用透析法或?qū)游龇蛛x法。
5、
【正確答案】 D
【答案解析】 異硫氰酸熒光素為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末，易溶于水或乙醇等溶劑。呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。其主要優(yōu)點(diǎn)是：①人眼對(duì)黃綠色較為敏感;②通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色熒光。
6、
【正確答案】 D
【答案解析】 免疫熒光顯微技術(shù)實(shí)驗(yàn)的類型包括直接法、間接法、熒光抗體染色結(jié)果判斷和雙標(biāo)記法。
7、
【正確答案】 B
【答案解析】 熒光素與蛋白質(zhì)結(jié)合比率(F/P)是指熒光素結(jié)合到抗體蛋白上的量。F/P值越高，表明抗體分子結(jié)合的熒光素越多，反之則結(jié)合越少。
8、
【正確答案】 A
【答案解析】 熒光抗體染色技術(shù)中，直接法的特異性高，非特異熒光染色因素少。
9、
【正確答案】 B
【答案解析】 在制作標(biāo)本過(guò)程中應(yīng)力求保持抗原的完整性，并在染色、洗滌和封埋過(guò)程中不發(fā)生溶解和變性，也不會(huì)擴(kuò)散至鄰近細(xì)胞或組織間隙中去。標(biāo)本切片要求盡量薄些，以利抗原抗體接觸和鏡檢。組織材料可制備成石蠟切片或冷凍切片。細(xì)胞或細(xì)菌可制成涂片，涂片或印片制成后應(yīng)迅速吹干、封裝，置-10℃保存或立即使用。
10、
【正確答案】 A
【答案解析】 FITC的最大吸收波長(zhǎng)為490～495nm。
11、
【正確答案】 C
【答案解析】 熒光顯微鏡的光源、物鏡、濾板、聚光器與普通顯微鏡不同。
12、
【正確答案】 A
【答案解析】 作為標(biāo)記的熒光素應(yīng)符合以下要求：①應(yīng)具有能與蛋白質(zhì)分子形成共價(jià)鍵的化學(xué)基團(tuán)，與蛋白質(zhì)結(jié)合后不易解離，而未結(jié)合的色素及其降解產(chǎn)物易于清除。②熒光效率高，與蛋白質(zhì)結(jié)合后，仍能保持較高的熒光效率。③熒光色澤與背景組織的色澤對(duì)比鮮明。④與蛋白質(zhì)結(jié)合后不影響蛋白質(zhì)原有的生化與免疫性質(zhì)。⑤標(biāo)記方法簡(jiǎn)單、安全無(wú)毒。⑥與蛋白質(zhì)的結(jié)合物穩(wěn)定，易于保存。
13、
【正確答案】 C
【答案解析】 用于標(biāo)記抗體的熒光素應(yīng)符合一系列的要求，其中為了觀察方便熒光色澤與背景應(yīng)當(dāng)對(duì)比鮮明。
14、
【正確答案】 B
【答案解析】 本題考查熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)及樣品的關(guān)系。要使熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)的濃度成正比，應(yīng)使樣品濃度適中。
15、
【正確答案】 D
【答案解析】 異硫氰酸熒光素呈明亮的黃綠色熒光;四乙基羅丹明呈橘紅色熒光;四甲基異硫氰酸羅丹明呈橙紅色熒光;藻紅蛋白呈明亮的橙色熒光。
16、
【正確答案】 C
【答案解析】 熒光偏振免疫測(cè)定樣品用量少;熒光素標(biāo)記結(jié)合物穩(wěn)定，使用壽命長(zhǎng);方法重復(fù)性好;快速，易自動(dòng)化;試劑盒專屬性強(qiáng)，適于檢測(cè)小分子和中等分子物質(zhì)，不適宜測(cè)定大分子物質(zhì);靈敏度較非均相熒光免疫測(cè)定法低。
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