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2014檢驗技師檢驗基礎講解:血涂片制備與染色

來源:考試吧 2013-12-23 17:41:02 考試吧:中國教育培訓第一門戶 模擬考場
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  血涂片制備與染色

  血涂片是通過特定的方法將血液按一定方向均勻涂開的過程,微觀上使細胞是由球形變?yōu)槠矫嫘位蚪矫嫘纹戒佋谳d玻片上。血涂片的顯微鏡檢查是血液細胞形態(tài)學檢查的基本步驟,特別是對于各種血液病的診斷和鑒別診斷,具有重要價值。血涂片制備是否合格、染色的好壞直接關系到檢驗結果的質量。

  (一)血涂片制備

  1.載玻片的準備

  新載玻片常帶有游離堿質,須用濃度為lmol/L的HCl浸泡24h,再用清水徹底沖洗,干燥后備用。舊載玻片要用含洗滌劑的清水中煮沸20min,洗掉血膜,再用清水反復沖洗,最后用0.95L/L乙醇浸泡1h,干燥備用。

  使用載玻片時,不要用手觸及玻片表面,保持玻片清潔、干燥、中性、無油膩。

  2.血涂片制作方法

  取血液標本一滴置載玻片的一端,以邊緣平滑的推片一端,從血滴前沿方向接觸血液,使血液沿推片散開,推片與載玻片保持30~45○夾角,平穩(wěn)地向前推動,血液即在載玻片上形成薄層血膜。

  涂片的厚薄與血滴大小、推片與載玻片之間的角度、推片時的速度及血細胞比容有關。血滴大、角度大、速度快則血膜越厚;反之則血膜越薄。

  一張良好的血涂片,要求厚薄適宜,頭體尾明顯,細胞分布均勻,血膜邊緣整齊并留有的空隙。

  (二)血涂片染色

  染色的目的是使細胞的主要結構,如細胞膜、細胞質、細胞核等染上不同的顏色,以便于鏡下觀察識別。

  血涂片染色包括兩個過程:固定和染色。固定是將細胞蛋白質和多糖等成分迅速交聯(lián)凝固,以保持細胞原有形態(tài)結構不發(fā)生變化。常用的染色方法有瑞特染色法(Wright)、姬姆薩染色法(Giemsa)等。

  1.瑞特(Wright)染色法

  本法的特點是將固定和染色合并在一起進行,手續(xù)簡便,染色時間短,對白細胞特異性顆粒著色較好,但對核的著色略差。

  2.姬姆薩(Giemsa)染色法姬姆薩染料由天青和酸性染料伊紅組成的復合染料。染色原理、緩沖液與瑞特染色法大致相同。本法對細胞核結構和寄生蟲著色較好,結構顯示更為清晰,但細胞質和顆粒著色較差。

  3.瑞-姬染色法

  瑞特染色液和姬姆薩染色液對細胞進行染色時有各自的顯色特征,前者對細胞漿和顆粒著色較好,后者對對細胞核結構顯示清晰。因此將瑞特染料和姬姆薩染料混合,甲醇溶解后組成瑞-姬染色液能取長補短,優(yōu)勢互補,其中所使用的緩沖液與瑞特染色法相同。用該混合染液對血細胞進行染色,細胞核、細胞漿和細胞內(nèi)顆粒著色均有上佳表現(xiàn),著色鮮艷,對比鮮明,是臨床上廣泛使用的方法。

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