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苷的提取分離方法
自植物中提取苷類物質(zhì)，一般都是采用水或醇進(jìn)行抽提。在提取時(shí)首先必須明確提取的目的要求，即要求提取的是原生苷、次生苷，還是苷元，然后，根據(jù)要求進(jìn)行提取，其提取方法是有差別的。由于植物體內(nèi)有水解酶共存，在提取過(guò)程中易使苷類物質(zhì)分解，因此在提取原存在形式的苷時(shí)，必須抑制或破壞酶的活性。一般常用的方法是在中藥中加入一定量的碳酸鈣，或采用甲醇、乙醇或沸水提取，同時(shí)在提取過(guò)程中還須盡量避免與酸和堿接觸，以免苷類水解，如不加注意，則往往得到的不是原生苷，而是已水解失去一部分糖的次生苷，或甚至是苷元。
各種苷類分子中，由于苷元結(jié)構(gòu)的不同，所連接糖的數(shù)目和種類也不一樣，很難有統(tǒng)一的提取方法，如果用不同極性的溶劑順次提取，則在每一提取部分中，都可能有苷的存在。
苷類的顯色反應(yīng)
苷類化合物由苷元和糖兩部分組成，故苷類化合物能發(fā)生相應(yīng)的苷元和糖的各種顯色反應(yīng)。苷元的結(jié)構(gòu)多種多樣。糖的顯色反應(yīng)中最重要的是Molish反應(yīng)，常用的試劑由濃硫酸和α-萘酚組成。硫酸兼有水解苷鍵的作用，生成的單糖在濃硫酸的作用下，失去三分子水，生成具有呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)的醛類化合物。由五碳糖生成的是糠醛，甲基五碳糖生成的是5-甲糠醛，六碳糖生成的是5-羥甲糠醛。這些糠醛衍生物和許多芳胺、酚類可縮合成有色物質(zhì)，可借此來(lái)檢識(shí)糖和苷類化合物的存在。
苷鍵的裂解
苷鍵裂解反應(yīng)是研究多糖和苷類的重要反應(yīng)。通過(guò)裂解反應(yīng)使苷鍵切斷，其目的在于了解組成苷類的苷元結(jié)構(gòu)及所連接的糖的種類和組成，決定苷元與糖以及糖與糖之間的連接方式。切斷苷鍵有的可用酸、堿催化等化學(xué)方法，有的需采用酶和微生物等生物學(xué)方法。
1.酸催化水解苷鍵具有縮醛結(jié)構(gòu)，易為稀酸催化水解。
2.堿催化水解一般的苷鍵對(duì)稀堿應(yīng)該相當(dāng)穩(wěn)定，不易被堿催化水解，但苷鍵具有酯的性質(zhì)時(shí)，如苷元為酸、酚、有羰基共軛的烯醇類或成苷的羥基β-位有吸電子基取代者，遇堿就能水解。
3.酶催化水解由于酸堿催化水解條件總的來(lái)說(shuō)比較劇烈，糖和苷元部分均有可能發(fā)生進(jìn)一步的變化，使產(chǎn)物復(fù)雜化，而且無(wú)法區(qū)別苷鍵的構(gòu)型。與此相比，酶促反應(yīng)具有專屬性高、條件溫和的特點(diǎn)。用酶水解苷鍵可以獲知苷鍵的構(gòu)型，可以保持苷元結(jié)構(gòu)不變，還可以保留部分苷鍵得到次級(jí)苷或低聚糖，以便獲知苷元和糖、糖和糖之問(wèn)的連接方式。
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