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常用的滅菌方法
【常用的滅菌方法】
滅菌法系指用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)手段將物品中活的微生物殺滅或除去的方法。
(一)物理滅菌法 利用蛋白質(zhì)與核酸具有遇熱和對射線不穩(wěn)定的特性，采用加熱、輻射或過濾的方法，殺滅或除去微生物的技術(shù)，稱為物理滅菌法。
1.干熱滅菌法系 指利用火焰或干熱空氣達(dá)到殺滅微生物或破壞熱原物質(zhì)的方法。加熱可以破壞蛋白質(zhì)與核酸中的氫鍵，導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性或凝固，核酸破壞，酶失去活性，使微生物死亡。干燥狀態(tài)下，熱穿透力差，微生物的耐熱性強(qiáng)，需長時(shí)間高熱才能達(dá)到滅菌的目的。藥典規(guī)定：干熱滅菌條件一般為(160～170)oC×120min以上、(170～180)℃×60min以上或250℃×45min以上，也可采用其他溫度和時(shí)間參數(shù)。250℃×45min的干熱滅菌也可除去無菌產(chǎn)品包裝容器及有關(guān)生產(chǎn)灌裝用具中的熱原物質(zhì)。本法適用于耐高溫但不宜用濕熱滅菌法滅菌的物品滅菌，如玻璃器皿、纖維制品、金屬材質(zhì)容器、固體藥品、凡士林、液體石蠟等。
2.濕熱滅菌法 系指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽等進(jìn)行滅菌的方法。由于蒸汽潛熱大，穿透力強(qiáng)，容易使微生物變性凝固，滅菌效率比干熱法高。
(1)熱壓滅菌法：系指將物品置于在熱壓滅菌柜內(nèi)，利用高壓飽和水蒸氣滅菌、過熱水噴淋等手段殺滅微生物的方法。本法滅菌能力強(qiáng)，為熱力滅菌中最有效、應(yīng)用最廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、無菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發(fā)生變化和損壞的物品均可采用本法滅菌。藥典規(guī)定：濕熱滅菌條件通常采用126℃(3×15min、121℃×30rain或116℃×40rain的程序。標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0值一般不低于8min。
使用熱壓滅菌柜應(yīng)注意的問題：①使用前應(yīng)檢查壓力表、溫度表、安全閥等儀表;②首先開啟放氣活門將柜內(nèi)空氣排盡;③先預(yù)熱，再升壓，升溫，達(dá)到預(yù)定壓力和溫度后開始計(jì)時(shí);④滅菌完畢后，待壓力表指針降至0后，打開放氣閥，排盡柜內(nèi)蒸汽，待溫度降至40℃以下，再緩緩開啟門蓋，驟然減壓會(huì)導(dǎo)致容器爆裂和藥液外溢。
(2)流通蒸汽滅菌法和煮沸滅菌法：系指在常壓下用水蒸氣或沸水滅菌的方法�！銥閘00℃，30—60min，可殺滅繁殖型細(xì)菌，但不一定能完全殺滅細(xì)菌孢子。一般可作為不耐熱無菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。
(3)低溫間歇滅菌法：系指將待滅菌的物品先在60～80℃加熱60min以殺死細(xì)菌繁殖體，然后室溫保溫24h，待細(xì)菌孢子發(fā)育成繁殖體，再同法操作2—3次，直至完全殺滅細(xì)菌孢子為止。此法適于必須采用加熱滅菌但又不耐較高溫度的產(chǎn)品。
3.過濾除菌法 系指利用細(xì)菌不能通過致密具孔濾材的原理以除去氣體或液體中微生物的方法。通常用于熱不穩(wěn)定的藥品溶液或原料的除菌。常用的除菌微孔濾膜孔徑一般不超過 0.22μm。過濾器不得對被濾過的成分有吸附作用，也不能釋放物質(zhì)，不得有纖維脫落，禁用含石棉的過濾器。濾器與濾膜在使用前應(yīng)進(jìn)行潔凈處理，并用高壓蒸汽進(jìn)行滅菌或做在線滅菌。更換品種和批次應(yīng)先清洗濾器，再更換濾膜。通過過濾除菌達(dá)到無菌的產(chǎn)品應(yīng)嚴(yán)密監(jiān)控其生產(chǎn)環(huán)境的潔凈度，應(yīng)在無菌環(huán)境下進(jìn)行過濾操作。
4.紫外線滅菌法 系指利用紫外線照射殺滅微生物的方法。波長254nm的紫外線殺菌力最強(qiáng)，可使微生物核酸蛋白變性死亡，同時(shí)空氣受紫外線輻射后產(chǎn)生的微量臭氧也起滅菌作用。由于紫外線穿透能力很差，所以紫外線滅菌法僅適于表面和空氣的滅菌。
5.砷60C0-γ射線輻射滅菌法 系指利60C0-^y射線殺滅微生物的方法。γ射線可使有機(jī)化合物分子直接發(fā)生電離，破壞正常代謝的自由基，導(dǎo)致微生物體內(nèi)大分子化合物分解而被殺滅。其特點(diǎn)是穿透力強(qiáng)，滅菌過程中，被滅菌物品溫度的變化d"0醫(yī)療器械、容器、生產(chǎn)輔助用品、不受輻射破壞的原料藥及成品等均可用本法滅菌;尤其適用于已包裝藥品的滅菌。輻射劑量的制定，事先應(yīng)驗(yàn)證所使用劑量不影響被滅菌物品的安全性、有效性及穩(wěn)定性。常用的輻射滅菌吸收劑量為25kGy。對最終產(chǎn)品、原料藥、某些醫(yī)療器材應(yīng)盡可能采用低輻射劑量滅菌。
6.微波滅菌法 系指利用微波照射殺滅微生物的方法。微波是指頻率在300MHz到300kMHz之間的電磁波。水和極性分子可強(qiáng)烈地吸收微波，使其分子運(yùn)動(dòng)和相互摩擦迅速升溫。微生物因體內(nèi)蛋白質(zhì)同時(shí)受熱和極性轉(zhuǎn)動(dòng)兩方面的作用，空間結(jié)構(gòu)變化或破壞而變性死亡。微波能穿透到介質(zhì)的深部，通常可使介質(zhì)加熱表里一致。適用于水性藥液的滅菌，也適用于藥材飲片及固體制劑的滅菌。
(二)化學(xué)滅菌法
化學(xué)滅菌法系 指用化學(xué)藥品殺滅微生物的方法。其殺菌機(jī)制可能是：作用于微生物核酸蛋白，使其變性、與微生物酶系統(tǒng)結(jié)合影響代謝或改變膜壁通透性致微生物死亡等。氣體滅菌法是常用的化學(xué)滅菌法。
氣體滅菌法系 指利用化學(xué)藥品形成的氣體殺滅微生物的方法。常用的化學(xué)藥品有環(huán)氧乙烷、氣態(tài)過氧化氫、甲醛、臭氧等。采用氣體滅菌法時(shí)應(yīng)注意滅菌氣體的可燃可爆性、致畸和殘留毒性。
本法常用的氣體是環(huán)氧乙烷，一般與80%一90%的惰性氣體混合使用，在充有滅菌氣體的高壓腔室內(nèi)進(jìn)行。環(huán)氧乙烷分子易穿透塑料、紙板和固體粉末，可用于塑料包裝的原料粉末、散劑、顆粒等固體藥料及其他不能采用高溫滅菌的物品滅菌。含氯物品以及能吸附環(huán)氧乙烷的物品不宜采用本法滅菌。
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