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天然維生素A
天然維生素A主要是全反式維生素A。
性質(zhì):具紫外吸收,易氧化變質(zhì),能與三氯化銻呈色,與氯仿、乙醚、環(huán)己烷或是由醚任意混合,在乙醇中微溶,在水中不溶。
鑒別試驗(yàn):
、偃然R反應(yīng)(Carr-price反應(yīng)):維生素A在飽和無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇氯仿溶液中,即顯藍(lán)色,漸變成紫紅色。
②紫外吸收光譜:維生素A分子中含有5個(gè)共軛雙鍵,其無(wú)水乙醇溶液在波長(zhǎng)326nm處有最大吸收。當(dāng)在演算催化下加熱,則發(fā)生去水反應(yīng)而生成脫水維生素A。后者比維生素A多一個(gè)共軛雙鍵,使其最大吸收峰紅移,同時(shí)在350~390nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)出現(xiàn)3個(gè)最大吸收峰。
③薄層色譜:以硅膠G為吸附劑,環(huán)己烷-乙醚(80:20)為流動(dòng)相。
含量測(cè)定:紫外分光光度法(三點(diǎn)校正法)
原理:本法是在三個(gè)波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,根據(jù)校正公式計(jì)算吸收度A校正值后,再計(jì)算含量,故本法亦稱“三點(diǎn)校正法”。原理如下:
、匐s質(zhì)的吸收在310~340nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)呈一條直線,且隨波長(zhǎng)的增大,吸收度變小。
、谖镔|(zhì)對(duì)光的吸收具有加和性。
三點(diǎn)波長(zhǎng)的選擇法:
、俚1點(diǎn):選擇維生素A的最大吸收波長(zhǎng)(即λ1)。
②第2點(diǎn)和第3點(diǎn):在最大吸收波長(zhǎng)的兩側(cè)各選一點(diǎn)(即λ2和λ3)。
等波長(zhǎng)差法:在λ1的左右各選一點(diǎn)為λ2和λ3,使λ3—λ1=λ1—λ2。維生素A醋酸酯。
等吸收法:在λ1的左右各選一點(diǎn)為λ2和λ3,使Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1。維生素A醇。
、垭s質(zhì)吸收:對(duì)維生素A的測(cè)定有影響的雜質(zhì)主要有:
維生素A2和維生素A3;維生素A的氧化產(chǎn)物(環(huán)氧化物、維生素A醛和維生素A酸);維生素A在光照下產(chǎn)生的無(wú)生物活性的聚合物鯨醇。
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