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2017年執(zhí)業(yè)藥師《藥物分析》考試章節(jié)知識點(13)

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第 1 頁:第一節(jié) 可見紫外分光光度法
第 2 頁:第二節(jié) 熒光分析法
第 3 頁:第三節(jié) 紅外分光光度法

  第二節(jié) 熒光分析法

  了解熒光分析法的基本原理和應用;熒光光度計的基本結構。

  一、基本原理

  熒光的產(chǎn)生:此化學物質能從外界吸收并儲存能量(如光能、化學能等)而進入激發(fā)態(tài),當其從激發(fā)態(tài)再回復到基態(tài)時,過剩的能量可以電磁輻射的形式放射(即發(fā)光)。熒光發(fā)射的特點是:可產(chǎn)生熒光的分子或原子在接受能量后即刻引起發(fā)光;而一旦停止供能,發(fā)光(熒光)現(xiàn)象也隨之在瞬間內消失。

  發(fā)射熒光的光量子數(shù)亦即熒光強度,除受激發(fā)光強度影響外,也與激發(fā)光的波長有關。各個熒光分子有其特定的吸收光譜和發(fā)射光譜(熒光光譜),即在某一特定波長處有最大吸收峰和最大發(fā)射峰。選擇激發(fā)光波長量接近于熒光分子的最大吸收峰波長,且測定光波量接近于最大發(fā)射光波峰時,得到的熒光強度也最大。

  物質的激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜,可以用作該物質的定性分析。當激發(fā)光強度、波長、所用溶劑及溫度等條件固定時,物質在一定濃度范圍內,其發(fā)射光強度與溶液中該物質的濃度成正比關系,可以用作定量分析。熒光分析法的靈敏度一般較紫外分光光度法或比色法為高,濃度太大的溶液會有“自熄滅”作用,故熒光分析法應在低濃度溶液中進行。

  二、熒光分光光度計

  激發(fā)光源→激發(fā)光單色器→樣品池

  ↓

  發(fā)射光單色器→檢測器→數(shù)據(jù)記錄處理

  樣品池用低熒光材料制成,四面透光,發(fā)射光方向與激發(fā)光成直角。

  三、應用:熒光分析可用于鑒別和含量測定。一般采用對照品比較法測定含量,靈敏度高、選擇性好,但干擾多、線性范圍窄,多用于需要高靈敏度和允許較大變異性的樣品分析。

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