2016年執(zhí)業(yè)藥師《藥物分析》精華輔導(dǎo)資料(1)

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　　雜質(zhì)的去除

　　酶提取液中常含有雜蛋白、多糖、脂類及核酸等雜質(zhì)，可用下述方法去除：

　　調(diào)PH和加熱法：利用蛋白質(zhì)對酸、堿和熱變性方面性質(zhì)的差異，可去除非活性雜蛋白。如制備脂肪酶時，在pH3、4時以400C溫度加熱150 min，淀粉酶活力可喪失90%而被除去，而脂肪酶活力仍保持80%以上。

　　蛋白質(zhì)表面變性法：蛋白質(zhì)表面變性后其性質(zhì)有所不同，借以去除雜蛋白。如制備過氧化氫酶時，加入氯仿和乙醇進行振蕩可以將雜蛋白變性而去除。

　　蛋白質(zhì)沉淀劑法：利用醋酸鋁、利凡諾、單寧酸、離子型表 面活性劑等蛋白質(zhì)沉淀劑可以去除雜蛋白及粘多糖類雜質(zhì)。使用時要注意這類試劑�？梢鹈缸冃允Щ睿虼藨�(yīng)迅速除去。

　　選擇性變性法：各種蛋白質(zhì)對變性劑的穩(wěn)定性不同，可以用選擇性變性劑去除雜蛋白。如細胞色素丙對三氯醋酸較穩(wěn)定，所以在制備時可用2.5%三氯醋酸使其他雜蛋白變性使沉淀除去。

　　加保護劑熱變性法：酶與底物或競爭性抑制劑結(jié)合后，其穩(wěn)定性常顯著增加。所以常用它們?yōu)楸Ｗo劑，再用一些劇烈手段破壞雜蛋白，如用D-甲基苯甲酸為D-氨基酸氧化酶的保護劑，經(jīng)加熱除去雜蛋白，使該酶得到很好的提純。

　　核酸沉淀劑法：酶液中的核酸類雜質(zhì)，可以用氯化錳、魚精蛋白硫酸鹽等沉淀劑使其沉淀而除去。必要時，也可用核糖核酶將核酸降解后除去。

　　苯妥英鈉藥物分析

　　方法名稱：苯妥英鈉—苯妥英鈉的測定—重量法。 應(yīng)用范圍：本方法采用重量法測定苯妥英鈉中苯妥英鈉的含量。 本方法適用于苯妥英鈉。

　　方法原理：供試品加水溶解后，加稀鹽酸，用乙醚振搖提取，置105℃恒重的蒸發(fā)皿中，低溫蒸去乙醚，并在105℃干燥至恒重，精密稱定，所得殘渣重量與1.087相乘，即苯妥英鈉的重量。

　　試劑：1.稀鹽酸 2.乙醚 儀器設(shè)備：蒸發(fā)皿 試樣制備：1.稀鹽酸 取鹽酸234mL加水稀釋至1000mL. 操作步驟：取供試品約0.3g，精密稱定，加水50mL溶解后，加稀鹽酸10mL，搖勻，用乙醚振搖提取5次，第一次100mL，以后每次各25mL，合并乙醚液，用水洗滌2次，每次5mL，合并洗液，用乙醚10mL振搖提取，合并前后兩次得到的乙醚液，置105℃恒重的蒸發(fā)皿中，低溫蒸去乙醚，并在105℃干燥至恒重，精密稱定，所得殘渣重量與1.087相乘，即得供試量中含苯妥英鈉(C15H11N2NaO2)的重量。

　　參考文獻：中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.323.

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