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毛細(xì)管電泳法
毛細(xì)管電泳法(capillaryelectrophoresis，CE)系指以彈性石英毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，依據(jù)供試品中各組分的淌度(單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的遷移速度)和(或)分配行為的差異而實(shí)現(xiàn)各組分分離的一種分析方法。
在平板電泳技術(shù)中，使用高電場(chǎng)強(qiáng)度會(huì)使電泳介質(zhì)發(fā)熱，即產(chǎn)生焦耳熱。焦耳熱會(huì)引起電泳分離介質(zhì)的溫度梯度、黏度梯度以及速度梯度，從而引起區(qū)帶展寬、分離效能降低。在毛細(xì)管電泳法中，由于毛細(xì)管具有很高的表面積一體積比，有利于熱量從管壁擴(kuò)散，可有效地克服焦耳熱的影響，因而具有很高的柱效。毛細(xì)管電泳儀的主要部件包括0～30kV可調(diào)穩(wěn)壓穩(wěn)流電源，內(nèi)徑小于1OOμm、長(zhǎng)度一般為20～1OOcm的彈性石英毛細(xì)管，電泳池，檢測(cè)器和進(jìn)樣裝置等。
毛細(xì)管電泳法主要有以下幾種分離模式：
1.毛細(xì)管區(qū)帶電泳
2.毛細(xì)管凝膠電泳
3.毛細(xì)管等速電泳
4.毛細(xì)管等電聚焦電泳
5.膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜
6.毛細(xì)管電色譜
薄層色譜法的應(yīng)用
(一)在鑒別試驗(yàn)中的應(yīng)用
1.與對(duì)照品比較RF值將同濃度的供試品溶液與對(duì)照品溶液，在同一塊薄層板上點(diǎn)樣、展開(kāi)與檢視，供試品溶液所顯示主斑點(diǎn)的位置(RF)應(yīng)與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)一致，而且兩主斑點(diǎn)的大小與顏色(或熒光)的深淺也應(yīng)大致相同;或采用供試品溶液與對(duì)照品溶液等體積混合后，點(diǎn)樣、展開(kāi)與檢視，應(yīng)顯示單一、緊密的斑點(diǎn)。
2.與結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)比較RF值選用與供試品化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的藥物對(duì)照品與供試品的T1C主斑點(diǎn)比較，兩者的RF應(yīng)不同，或?qū)⑸鲜鰞煞N溶液等體積混合，應(yīng)顯示兩個(gè)清晰分離的斑點(diǎn)。
(二)在雜質(zhì)檢查中的應(yīng)用
1.雜質(zhì)對(duì)照法
2.自身稀釋對(duì)照法
3.其他方法除上述兩種方法外，也可將雜質(zhì)對(duì)照法與供試品溶液自身稀釋對(duì)照法并用。即特定雜質(zhì)限度采用雜質(zhì)對(duì)照品法，其他雜質(zhì)限度采用供試品溶液自身稀釋對(duì)照法控制。通常應(yīng)規(guī)定雜質(zhì)的斑點(diǎn)數(shù)和單一雜質(zhì)量，當(dāng)采用系列自身稀釋對(duì)照溶液時(shí)，也可規(guī)定估計(jì)的雜質(zhì)總量。
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