第十七章 抗生素類藥物的分析
除一般雜質檢查外,還收載有關物質、聚合物檢查;異常毒性、降壓物質、熱原、細菌內毒素、無菌等安全性檢查項目。
第一節(jié) 青霉素鈉和青霉素鉀及其制劑的分析
青霉素族中的母核為6-氨基青霉烷酸(簡稱6-APA),游離羧基酸性,能與無機堿或某些有機堿成鹽。β-內酰胺環(huán)不穩(wěn)定,遇酸、堿、青霉素酶及某些金屬離子等作用,易發(fā)生水解和分子重排,導致β-內酰胺環(huán)的破壞而失去抗菌活性。
一、鑒別
1.HPLC
2.紅外光譜法
3.焰色反應 鈉鹽火焰鮮黃色;鉀鹽紫色。
二、檢查
1.吸收度 側鏈苯環(huán)在264nm有最大吸收,而降解產物在280nm有最大吸收。測定264nm吸收度為控制青霉素鈉含量。規(guī)定280nm吸收度為控制雜質限量。
2.聚合物:引起過敏性休克,分子排阻色譜法檢查,外標法計算
3.水分:本品遇水易水解,費休法測定水分不得超過0.5%。
4.細菌內毒素 細菌內毒素檢查法。利用鱟試劑與細菌內毒素發(fā)生凝集反應,來判斷內毒素是否符合規(guī)定。
5.無菌 滅活后,無菌檢查法檢查。
三、含量測定
反相高效液相色譜法,外標法計算含量。
使用酸性流動相使青霉素成為分子狀態(tài),利于分離。
四、注射液青霉素鈉、鉀
鑒別相同
檢查:溶液澄清度與顏色、青霉素聚合物、水分、酸堿度、細菌內毒素、無菌
第二節(jié) 阿莫西林及其制劑的分析
一、阿莫西林的分析
(一)鑒別:HPLC、紅外光譜法
(二)檢查
1.有關物質:主要是降解產物。采用HPLC法,由于種類多、極性差異大,采用梯度洗脫法。
2.聚合物:分子排阻色譜法檢查
3.水分 含3分子結晶水,按費休法測定含水應為12.0~15.0%
(三)含量測定
高效液相色譜法,外標法計算含量。
二、制劑分析
有關物質限度略寬,口服制劑測定溶出度
第三節(jié) 頭孢羥氨芐及其制劑的分析
一、鑒別
1.HPLC 與對照品保留時間一致
2.紅外光譜法
二、檢查
1.有關物質 主要檢查α-對羥基苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸及其他有關物質。采用HPLC法檢查。前兩者用對照品比較法,其他雜質用高低濃度對比法。
2.水分 含1分子結晶水,按費休法測定含水應為4.2~6.0%
三、含量測定
高效液相色譜法,外標法計算含量。
四、制劑分析
口服制劑測定溶出度,其他與原料藥同
第四節(jié) 硫酸慶大霉素及其制劑的分析
一、鑒別
1.茚三酮反應 分子中有α-羥基胺結構,可與茚三酮縮合成藍紫色化合物。
2.薄層色譜法
3.紅外光譜法
二、檢查
1.水分 按費休法測定含水不得超過15.0%
2.硫酸鹽 配位滴定法
先加入定量過量氯化鋇滴定液,形成硫酸鋇沉淀。剩余Ba2+再用EDTA滴定液滴定。本品含硫酸鹽應為32.0~35.0%。
3.細菌內毒素
4.C組分檢查 HPLC
慶大霉素為C組分復合物,其不同C組分活性無明顯差異,但其毒副作用不同,需控制其相對含量。本品無紫外吸收,用蒸發(fā)光散射檢測器檢測
三、含量測定 微生物檢定法
四、制劑分析
注射液檢查pH值、顏色、無菌、細菌內毒素;緩釋片檢查釋放度
第五節(jié) 鹽酸四環(huán)素及其制劑的分析
一、鑒別
1.三氯化鐵反應:具酚羥基和烯醇結構,與鐵離子形成紅色配合物
2.高效液相色譜法 供試品與對照品保留時間一致
3.紅外分光光度法 測定最大吸收波長和相應吸收度
4.氯化物鑒別反應
二、檢查
1.有關物質 主要是差向四環(huán)素、脫水四環(huán)素、差向脫水四環(huán)素和金霉素等。采用HPLC法檢查,加校正因子的主成份對照法
2.雜質吸收度 控制本品中差向異構體、脫水異構體及其他雜質。此類雜質在530nm波長有較強吸收,控制樣品在530nm吸收度,達到控制雜質的目的。
3.酸度、溶液澄清度、熱原、無菌
三、含量測定
HPLC,外標法計算。
四、制劑分析
片劑、膠囊劑雜質限度有所放寬,需測定溶出度
第六節(jié) 羅紅霉素及其制劑的分析
一、鑒別
1.HPLC
2.紅外光譜法
二、檢查
1.堿度 測定pH值
2.有關物質 HPLC,主成份自身對照法
3.水分 按費休法測定含水不得超過3.0%
三、含量測定 HPLC,外標法計算
四、制劑分析
有關物質限度有所不同