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執(zhí)業(yè)藥師考試

2013執(zhí)業(yè)藥師考試藥物分析復(fù)習(xí)講義(7)

  第七章 體內(nèi)藥物分析法

  治療藥物監(jiān)測(Therapeutic Drug Monitoring, TDM)

  第一節(jié) 體內(nèi)樣品的種類

  體內(nèi)樣品包括各種體液和組織。主要包括血液、尿液、唾液。 最為常用的樣本是血液。

  體內(nèi)樣品的采集時間:根據(jù)臨床治療藥物監(jiān)測的不同目的確定。

  一 血樣

  血樣包括全血(whole blood)、血漿(plasma)和血清(serum),是最為常用的體內(nèi)樣品。

  1. 血樣(全血)的采集

  采集后置含有抗凝劑的試管中,常用的抗凝劑有肝素、EDTA、草酸鹽、枸櫞酸鹽等。

  2. 血漿的制備 更為常用

  將采集的全血置含有抗凝劑的試管中, 離心, 分取上清液即為血漿。

  3. 血清的制備

  將采集的全血在室溫下放置至少0.5~1.0h,待血液凝固后,再離心,分取上清液即為血清。

  血樣采集后應(yīng)及時分離血漿或血清,并最好立即分析。否則,短期保存時可置冰箱冷藏(4℃),長期保存需在-20℃或-80℃下冷凍貯藏。全血未經(jīng)分離時不宜直接冷凍保存。

  若待測藥物在樣本中易受酶或酸堿等的作用發(fā)生進(jìn)一步變化,可選用的處置方法包括低溫冷凍、調(diào)節(jié)酸堿度、加酶抑制劑等。

  二 尿液

  尿液濃度測定主要用于藥物尿液累積排泄量、尿清除率或生物利用度的研究,以及藥物代謝物及其代謝途徑、類型和速率等的研究。臨床上亦可推斷患者是否違反醫(yī)囑用藥。

  尿液樣品的采集和測定應(yīng)當(dāng)與腎功能指標(biāo)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。

  測定尿液中藥物濃度時應(yīng)采用時間尿 。測定尿液中藥物的總量時,應(yīng)收集用藥后一定時間內(nèi)的全部尿液,進(jìn)行分析。

  一 唾液

  唾液是腮腺、頜下腺、舌下腺和口腔黏膜腺體分泌的黏液在口腔里混合而成的消化液。

  唾液的采集方法:盡可能在安靜狀態(tài)下進(jìn)行,一般在漱口后15min收集,1min內(nèi)大約可采集1ml。采集后應(yīng)立即測量其除去泡沫部分的體積,離心,分取上清液。

  第一節(jié) 體內(nèi)樣品處理

  一、 體內(nèi)樣品處理的目的:減少干擾、提高檢測靈敏度和特異性、降低對儀器的污染和損害。

  二、 體內(nèi)樣品處理的常用方法

  血漿或血清需除蛋白;尿液樣品常采用酸或酶水解使藥物從綴合物中釋出;唾液樣品則主要采用離心沉淀除去粘蛋白。

  體內(nèi)樣品處理常用方法有:去除蛋白質(zhì)法、綴合物水解法、分離純化與濃集法、化學(xué)衍生化法

  (一) 去除蛋白質(zhì)法

  去除蛋白質(zhì)常用的方法包括蛋白沉淀法和蛋白分解法。

  1. 蛋白沉淀法 常用的方法包括:加入有機溶劑、強酸和無機鹽。

  (1) 加入與水混溶的有機溶劑

  水溶性的有機溶劑可使蛋白質(zhì)分子內(nèi)及分子間的氫鍵變化,使蛋白質(zhì)凝聚,進(jìn)而使與之結(jié)合的藥物釋放。

  常用的水溶性有機溶劑有:乙腈、甲醇、丙酮、四氫呋喃等。

  乙腈沉淀蛋白質(zhì)為絮狀,易于離心去除;甲醇沉淀蛋白則為細(xì)小顆粒狀,需高速離心去除。使用乙腈或甲醇時上清液pH為8.5~9.5,使用丙酮時上清液pH為9~10。

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