歡迎進(jìn)入:2009執(zhí)業(yè)藥師課程免費(fèi)試聽(tīng) 更多信息請(qǐng)?jiān)L問(wèn):考試吧執(zhí)業(yè)藥師論壇
(一)家兔發(fā)熱試驗(yàn)法
熱原檢查目前各國(guó)藥典法定的方法仍為家兔發(fā)熱試驗(yàn)法,屬限度試驗(yàn)。它是將一定量的供試品,由靜脈注入家兔體內(nèi),在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀察體溫的變化情況,如家兔體溫升高的度數(shù)超過(guò)規(guī)定限度即認(rèn)為有熱原反應(yīng)。具體試驗(yàn)方法和結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)《中國(guó)藥典》(2000年版)二部附錄。
本法結(jié)果準(zhǔn)確,但費(fèi)時(shí)較長(zhǎng)、操作繁瑣,不利于連續(xù)生產(chǎn)。
(二)鱟試驗(yàn)法
本法操作簡(jiǎn)單、結(jié)果迅速可得、靈敏度高。但本法對(duì)革蘭氏陰性以外的內(nèi)毒素不敏感,故還不能完全代替家兔發(fā)熱試驗(yàn)法。常用于某些不能用家兔進(jìn)行熱原檢測(cè)的品種,如放射性藥劑等;也適用于生產(chǎn)注射藥品時(shí),檢測(cè)中間產(chǎn)品是否污染熱原。原理是利用動(dòng)物鱟的變形細(xì)胞溶解物與引起熱原反應(yīng)的細(xì)菌內(nèi)毒素之間可產(chǎn)生的凝膠反應(yīng),從而定性或定量地測(cè)定此內(nèi)毒素。
測(cè)定方法:取4支無(wú)菌、無(wú)熱原帶塞玻璃試管放于37℃水浴中,向每支試管中加入0.2ml鱟試劑。向第1支試管內(nèi)加入0.9%NaCl液0.2ml,作陰性對(duì)照管,此管應(yīng)無(wú)凝膠生成(因無(wú)熱原不應(yīng)有凝膠生成);向第2支試管內(nèi)加入0.9%NaCl與0.05μg/ml標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素混合液0.2ml,作陽(yáng)性對(duì)照管,30分鐘應(yīng)出現(xiàn)穩(wěn)定的凝膠(試管倒轉(zhuǎn)180度,凝膠固定不變),說(shuō)明鱟試劑有效;向第3支試管內(nèi)加樣品溶液與0.05μg/ml標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素混合液0.2ml作假陽(yáng)性對(duì)照管,30分鐘應(yīng)出現(xiàn)穩(wěn)固的凝膠,說(shuō)明供試品內(nèi)不致有干擾物質(zhì)存在;向第4支試管內(nèi)加入檢品溶液0.2ml,30分鐘后若無(wú)凝膠生成,證明檢品中無(wú)熱原存在。操作時(shí)一般可將試管傾斜45度觀察,如含有熱原,多在20分鐘就出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng),同時(shí)還須注意如溫度、pH值及沉淀劑等對(duì)鱟試劑的干擾作用。
相關(guān)推薦:2009年執(zhí)業(yè)藥師考試藥事管理與法規(guī)預(yù)測(cè)題匯總北京 | 天津 | 上海 | 江蘇 | 山東 |
安徽 | 浙江 | 江西 | 福建 | 深圳 |
廣東 | 河北 | 湖南 | 廣西 | 河南 |
海南 | 湖北 | 四川 | 重慶 | 云南 |
貴州 | 西藏 | 新疆 | 陜西 | 山西 |
寧夏 | 甘肅 | 青海 | 遼寧 | 吉林 |
黑龍江 | 內(nèi)蒙古 |