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生物素-親和素放大技術
一、A1
1、每個親和素能結(jié)合生物素分子的數(shù)目是
A、4
B、2
C、1
D、3
E、8
2、生物素親和素系統(tǒng)(BAS)放大作用的機制主要是
A、親和素的四個生物素部位可同時結(jié)合多價性的生物素化衍生物
B、生物素、親和素可分別與酶、放射性核素等結(jié)合形成標記物
C、二者之間極高的親和力
D、經(jīng)化學修飾后,生物素成為活化生物素
E、生物素、親和素之間為特異性結(jié)合
3、活化生物素標記大分子蛋白質(zhì)后,影響生物素活性的主要因素是
A、大分子蛋白質(zhì)中的賴氨酸的a氨基
B、連接臂的6-氨基己糖基團
C、大分子蛋白的空間位阻效應
D、大分子蛋白的等電點發(fā)生改變
E、以上都不是
4、ABC-ELISA將酶標記在
A、親和素
B、生物素
C、抗體
D、補體
E、抗原
5、關于生物素標記蛋白質(zhì)的注意事項,下列說法錯誤的是
A、根據(jù)抗原或抗體分子結(jié)構中所帶可標記基團的種類以及分子的理化性質(zhì),選擇相應的活化生物素和反應條件
B、活化生物素與待標記抗原或抗體可以是任意比例
C、在生物素與被標記物之間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構可減少空間位阻影響
D、生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后不影響后者的免疫活性
E、生物素標記酶時會影響其免疫活性
6、親和素和生物素結(jié)合的特點是
A、免疫反應
B、不屬于免疫反應
C、特異性弱
D、親和力小
E、不夠穩(wěn)定
參考答案:
一、A1
1、
【正確答案】 A
【答案解析】 親和素(AV)亦稱抗生物素蛋白、卵白素,是從卵白蛋白中提取的一種由4個相同亞基組成的堿性糖蛋白。每個親和素能結(jié)合4個分子的生物素,二者之間的親和力極強。
2、
【正確答案】 A
【答案解析】 每個親和素分子有四個生物素結(jié)合部位,可同時以多價形式結(jié)合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。
3、
【正確答案】 C
【答案解析】 活化生物素標記大分子蛋白質(zhì)后,影響生物素活性的主要因素是大分子蛋白的空間位阻效應?臻g位阻效應主要是指分子中某些原子或基團彼此接近而引起的空間阻礙和偏離正常鍵角而引起的分子內(nèi)的張力。
4、
【正確答案】 B
【答案解析】 酶標記生物素分子,與親和素按一定比例混合,形成親和素-酶標生物素復合物。
5、
【正確答案】 B
【答案解析】 生物素標記蛋白質(zhì)的注意事項包括:①根據(jù)抗原或抗體分子結(jié)構中所帶可標記基團的種類以及分子的理化性質(zhì),選擇相應的活化生物素和反應條件。②標記反應時,活化生物素與待標記抗原或抗體應有適當比例。③為了減少空間位阻影響可在生物素與被標記物之間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構。④生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后不影響后者的免疫活性;標記酶時則結(jié)果有不同。
6、
【正確答案】 B
【答案解析】 親和素與生物素結(jié)合不屬于免疫反應,但特異性強,親和力大,兩者結(jié)合后極其穩(wěn)定。
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