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2015年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師《微生物學(xué)》復(fù)習(xí)精講(19)

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病毒感染的檢查方法

  (1)標(biāo)本的采集與送檢

  病毒感染的檢查結(jié)果取決于標(biāo)本的正確采集和遞送。發(fā)病初期或急性期采集的標(biāo)本,易于分離出病毒。血清學(xué)診斷的標(biāo)本,應(yīng)在患者急性期和恢復(fù)期各取一份血液,以便對(duì)比雙份血清中抗體效價(jià)。

  (2)病毒分離培養(yǎng)的方法

  ①雞胚接種:雞胚對(duì)多種病毒敏感。根據(jù)病毒種類不同,可將標(biāo)本接種于雞胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黃囊或絨毛尿囊膜上,主要用于流感病毒的分離。

 、诮M織培養(yǎng):將離體活組織塊或分散的活細(xì)胞加以培養(yǎng),統(tǒng)稱為組織培養(yǎng)。組織培養(yǎng)法有三種基本類型:器官培養(yǎng)、移植培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)最常用于培養(yǎng)病毒。

 、蹌(dòng)物接種:這是最原始的病毒培養(yǎng)方法。常用的動(dòng)物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接種的途經(jīng)有鼻內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、腦內(nèi)、腹腔內(nèi)等。根據(jù)病毒種類不同,選擇敏感動(dòng)物及適宜接種途徑。

  (3)病毒感染的血清學(xué)診斷方法:

  常用的方法有中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)等方法。和應(yīng)用免疫學(xué)標(biāo)記技術(shù)發(fā)展的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、放射免疫試驗(yàn)(RIA)及免疫熒光試驗(yàn)(IF)等特異、靈敏的微量血清學(xué)方法。

  ①中和試驗(yàn)(NT):是指病毒在或體內(nèi)或細(xì)胞培養(yǎng)中,被特異性抗體中和而失去感染性的一種試驗(yàn)。中和抗體特異性高,持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),因此流行病學(xué)常用此法。

 、谘种圃囼(yàn):許多病毒能凝集雞、豚鼠、人等的紅細(xì)胞,稱為血凝現(xiàn)象。這種現(xiàn)象能被相應(yīng)抗體所抑制,稱血凝抑制試驗(yàn)。

  ③酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、放射免疫試驗(yàn)(RIA)及免疫熒光試驗(yàn)(IF)

  ④蛋白印跡試驗(yàn)(WB)

 、輽z測(cè)病毒核酸的分子生物學(xué)試驗(yàn):聚合酶鏈反應(yīng)(PCR);核酸雜交技術(shù);基因芯片技術(shù);病毒基因測(cè)序等

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