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　　限制性片段長度多態(tài)性檢測技術(shù)

　　這是首先建立的對多態(tài)性進(jìn)行檢測的DNA分析技術(shù)。個(gè)體間抗原特異性來自氨基酸順序的差別，后者由編碼基因的堿基順序不同所決定。這種堿基順序的差別造成限制性內(nèi)切酶識位置及酶切位點(diǎn)數(shù)目的不同，從而產(chǎn)生數(shù)量和長度不一的DNA酶切片段。用特異性探針對整個(gè)基因組DNA酶切片段進(jìn)行雜交，即可分析限制性長度片段多態(tài)性。一定的內(nèi)切酶組合所得到的HLA-RFLP可以和傳統(tǒng)方法測定的HLA特異性型別相關(guān)。80年代末發(fā)展起來的PCR技術(shù)已被用于RFLP分析，即用等位特異限制酶裂解PCR擴(kuò)增的片段，然后再進(jìn)行分析，從而大提高了靈敏度。

　　HLA-Ⅰ類抗原的檢測

　　HLA-A、B、C抗原型別鑒定均借助微量淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)或稱補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒試驗(yàn)。原理為取已知HLA抗血清加入待測外周血淋巴細(xì)胞，作用后加入免補(bǔ)體，充分作用后加入染料，在倒置顯微鏡下判斷結(jié)果，著染的細(xì)胞為死亡細(xì)胞，表示待檢淋巴細(xì)胞表面具有已知抗血清所針對的抗原。標(biāo)準(zhǔn)抗原清取自多次經(jīng)產(chǎn)婦或計(jì)劃免疫志愿者。

　　細(xì)胞學(xué)分型技術(shù)

　　HLA-Dw特異性與HLA-DP特異性可分別通過純合分型細(xì)胞及預(yù)致敏淋巴細(xì)胞試驗(yàn)檢測。二種方法的基本原理均是判斷淋巴細(xì)胞在識別非已HLA抗原決定簇后發(fā)生的增殖反應(yīng)。由于分型細(xì)胞來源困難以及操作手續(xù)繁瑣，細(xì)胞學(xué)分型技術(shù)下正逐漸淘汰。

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