一、A1
1、
【正確答案】 C
【答案解析】 有限稀釋法不需特殊設(shè)備,克隆出現(xiàn)率高,為實驗室最常用的方法。
2、
【正確答案】 C
【答案解析】 雜交瘤技術(shù)的原理是利用聚乙二醇(PEG)為細胞融合劑,使免疫的小鼠脾細胞與具有體外長期繁殖能力的小鼠骨髓瘤細胞融為一體,在HAT選擇性培養(yǎng)基的作用下,只讓融合成功的雜交瘤細胞生長,經(jīng)過反復的免疫學檢測、篩選和單個細胞培養(yǎng)(克隆化),最終獲得既能產(chǎn)生所需單克隆抗體,又能長期繁殖的雜交瘤細胞系。
3、
【正確答案】 B
【答案解析】 雜交瘤細胞由骨髓瘤細胞和脾細胞融合形成的,其合成DNA的主要途徑雖然被氨基蝶呤(A)阻斷。
4、
【正確答案】 A
【答案解析】 雜交瘤細胞有骨髓瘤細胞和脾細胞融合形成的,其合成DNA的主要途徑雖然被氨基蝶呤阻斷,但由于與脾細胞融合,可獲得其HGPRT,利用次黃嘌呤合成為嘌呤堿,最終與嘧啶一起合成DNA。因此,雜交瘤細胞在選擇性得以生存,故能夠在HAT培養(yǎng)基長期存活。
5、
【正確答案】 B
【答案解析】 單克隆抗體來源于一個(克隆)B細胞,因此具有兩個完全相同的抗原結(jié)合部位。其他都不是單克隆抗體分子都有的特性。
6、
【正確答案】 D
【答案解析】 細胞融合的選擇培養(yǎng)基中有三種關(guān)鍵成分:次黃嘌呤(H)、甲氨蝶呤(A)、胸腺嘧啶核苷(T),所以取三者的字頭稱為HAT培養(yǎng)基。只有融合細胞具有親代雙方遺傳性能,才能在HAT培養(yǎng)基上長期存活與繁殖,如雜交瘤細胞。
7、
【正確答案】 E
【答案解析】 克隆化培養(yǎng)后的陽性雜交瘤細胞應及時凍存,最好保存在-196℃液氮中。
8、
【正確答案】 D
【答案解析】 人源化抗體主要指鼠源單克隆抗體以基因克隆及DNA重組技術(shù)改造,重新表達的抗體,其大部分氨基酸序列為人源序列取代,基本保留親本鼠單克隆抗體的親和力和特異性,又降低了其異源性,有利于人體。
9、
【正確答案】 B
【答案解析】 制備單克隆抗體時,可采用動物體內(nèi)誘生方法:先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不完全佐劑,一周后將雜交瘤細胞懸液注射腹腔,1~2周后,無菌抽取腹水,離心取上清液即可。
10、
【正確答案】 B
【答案解析】 單克隆抗體制備時最佳的融合效果應是最低程度的細胞損傷而又產(chǎn)生最高頻率的融合。聚乙二醇(PEG1000~2000)是目前最常用的細胞融合劑,一般應用濃度為40%(W/V)。
11、
【正確答案】 E
【答案解析】 制備單克隆抗體常選用小鼠的腹腔細胞作為飼養(yǎng)細胞。先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不完全佐劑,一周后將雜交瘤細胞懸液注射腹腔,1~2周后,無菌抽取腹水,離心取上清液即可。
12、
【正確答案】 C
【答案解析】 細胞在傳代過程中,部分細胞可能有返祖現(xiàn)象,應定期用8-氮鳥嘌呤(8-AG)進行處理,使生存的細胞對HAT呈均一的敏感性。
13、
【正確答案】 E
【答案解析】 雙特異性不同的兩個小分子抗體連接在一起可得到雙特異性抗體。雙特異性抗體能同時結(jié)合兩種抗原,因而可介導標記物與靶抗原結(jié)合或某些效應因子定位于靶細胞,在免疫學檢測中可簡化操作步驟,提高檢驗質(zhì)量;應用雙特異性抗體介導的藥物殺傷效應可用于腫瘤等的治療。
14、
【正確答案】 E
【答案解析】 甲氨蝶呤(A)是葉酸的拮抗藥,可阻斷瘤細胞利用正常途徑合成DNA。
15、
【正確答案】 C
【答案解析】 單克隆抗體在醫(yī)學中用于:①作為診斷試劑,用于診斷各類病原體,目前這是McAb應用最多的領(lǐng)域之一;②腫瘤特異性抗原和相關(guān)抗原的檢測。用于腫瘤的診斷、分型及定位;③檢測淋巴細胞表面標志物,用于區(qū)分細胞亞群和細胞分化階段;④抗原微量成分的檢測及對酶類、激素、維生素、藥物等的檢測;⑤在防治工作中如惡性腫瘤的治療,“生物導彈”的研制等都有廣泛前景;⑥研究工作中用作“探針”,確定大分子生物物質(zhì)在細胞中的分布及位置;⑦用于抗原物質(zhì)的提取及純化。
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