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血漿脂蛋白代謝
1)采用電泳法將脂蛋白分為α、前β、β及乳糜微粒(CM)四類;或采用超速離心法分為乳糜微粒(CM)、極低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等四類。
(2)各類血漿脂蛋白均由蛋白質(zhì)、甘油三酯(TG)、磷脂(PL)、膽固醇(Ch)及其酯(CE)等組成。
(3)血漿脂蛋白中的蛋白質(zhì)部分稱載脂蛋白(apo),至今已分離出20種apo,主要包括apoA、B、C、D、E等5類。主要功能:①結(jié)合和轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì),穩(wěn)定脂蛋白結(jié)構(gòu)。
②調(diào)節(jié)脂蛋白代謝關(guān)鍵酶的活性。
③參與脂蛋白受體的識(shí)別。
④參與脂蛋白間脂質(zhì)交換。
結(jié)構(gòu)研究主要方法
1、確定分子式并計(jì)算不飽和度
元素定量分析配合分子量測(cè)定;同位素豐度比法;高分辨質(zhì)譜法(HR-MS)
2、質(zhì)譜(MS) 確定分子量及計(jì)算分子式
常用的有:電子轟擊質(zhì)譜(EI-MS提供分子離子峰和碎片離子峰);場(chǎng)解析質(zhì)譜(FD-MS可得到明顯的分子離子峰)等、快原子轟擊質(zhì)譜(FAB-MS糖和苷分子離子峰、糖和苷元的結(jié)構(gòu)片段); 化學(xué)電離(CI),場(chǎng)致電離(FI);電噴霧電離(ESI),適于對(duì)熱不穩(wěn)定化合物。
3、紅外(IR) 分子中價(jià)鍵的伸縮及彎曲振動(dòng)將在光的紅外區(qū)域,即4000~400cm-1處引起吸收。測(cè)得的吸收?qǐng)D譜叫紅外光譜
4000~1500特征頻率區(qū),1500~600指紋區(qū)
4、紫外(UV)-可見(jiàn)吸收光譜 分子中的電子可因光線照射從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)。其中,“π-π*”躍遷以及“n-π*”躍遷可因吸收紫外光及可見(jiàn)光而引起,吸收光譜將出現(xiàn)在光的紫外及可見(jiàn)區(qū)域。
對(duì)分子中含有共軛雙鍵、α、β-不飽和羰基的結(jié)構(gòu)以及芳香族化合物有意義。
5、核磁共振譜 NMR譜是化合物分子在磁場(chǎng)中受電磁波的輻射,具有磁矩的原子核吸收一定的能量產(chǎn)生能級(jí)的躍遷,即發(fā)生核磁共振,以吸收峰的頻率對(duì)吸收強(qiáng)度作圖所得之圖譜
(1)氫核磁(1H-NMR)可以給出化學(xué)位移(δ)、積分面積以及裂分情況(偶合常數(shù)(J)),提供質(zhì)子的類型、數(shù)目以及相鄰原子或原子團(tuán)的信息。
(2)碳核磁(13C-NMR) 化學(xué)位移(δ)、異核偶合常數(shù)(JCH)及弛豫時(shí)間(T1)
噪音去偶譜(COM,也叫全氫去偶或?qū)拵ヅ糂BD) 單峰出現(xiàn)
DEPT 不同類型的信號(hào)在譜圖上成單峰形式分別向上或向下,信號(hào)之間很少重疊。
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