血紅蛋白電泳
原理:
根據(jù)不同的血紅蛋白帶有不同的電荷,等電點不同,在一定的pH緩沖液中,緩沖液的pH大于Hb的等電點時其帶負(fù)電荷,電泳時在電場中向陽極泳動,反之,Hb帶正電荷向陰極泳動。經(jīng)一定電壓和時間的電泳,不同的血紅蛋白所帶電荷不同、相對分子質(zhì)量不同,其泳動方向和速度不同,可分離出各自的區(qū)帶,同時對電泳出的各區(qū)帶進行電泳掃描,可進行各種血紅蛋白的定量分析。
血紅蛋白電泳的參考值
pH8.6TEB緩沖液醋酸纖維膜電泳,正常血紅蛋白電泳區(qū)帶:HbA>95%、HbF<2%、HbA2為1.0%~3.1%。pH8.6TEB緩沖液適合于檢出HbA、HbA2、HbS、HbC,但HbF不易與HbA分開,HbH與HbBarts不能分開和顯示,應(yīng)再選擇其他緩沖液進行電泳分離。
pH6.5TEB緩沖液醋酸纖維膜電泳,主要用于HbH和HbBarts的檢出。HbH等電點為5.6,在pH6.5TEB緩沖液中電泳時泳向陽極,HbBarts則在點樣點不動,而其余的血紅蛋白都向陰極移動。
血紅蛋白電泳的臨床意義
通過與正常人的血紅蛋白電泳圖譜進行比較,可發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白區(qū)帶,如HbH、HbE、HbBarts、HbS、HbD和HbC等。
HbA2增多,見于β珠蛋白合成障礙性貧血,為雜合子的重要實驗室診斷指標(biāo)。HbE病時也在HbA2區(qū)帶位置處增加,但含量很大(在10%以上)。HbA2輕度增加亦可見于肝病、腫瘤和某些血液病。
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