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　　針對尿酮體的常見檢測方法

　　1.試帶法

　　基于傳統(tǒng)的濕化學亞硝基鐵氰化鈉法而設計，是目前臨床上最常用的尿酮體篩檢方法。檢測過程簡易快速，尤其適合于床邊檢驗。應注意不同試帶對丙酮和乙酰乙酸的靈敏度不一。

　　2.濕化學法

　　(1)Rothera法：在堿性條件下，亞硝基鐵氰化鈉可與尿中的乙酰乙酸、丙酮起反應呈現(xiàn)紫色，但不與β-羥丁酸起反應。

　　(2)Gerhardt法：高鐵離子(Fe3+)與乙酰乙酸的烯醇式基團發(fā)生螯合，形成酒紅色復合物。

　　3.片劑法

　　基本原理為亞硝基鐵氰化鈉法。

　　關于間接血凝試驗的具體操作過程說明

　　1.載體

　　紅細胞是大小均一的載體顆粒，最常用的為綿羊、家兔、雞的紅細胞及O凝型人紅細胞。新鮮紅細胞能吸附多糖類抗原，但吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力較差。致敏的新鮮紅細胞保存時間短，且易變脆、溶血和污染，只能使用2～3d.為此一般在致敏前先將紅細胞醛化，可長期保存而不溶血。常用的醛類有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。紅細胞經(jīng)醛化后體積略有增大，兩面突起呈圓盤狀。醛化紅細胞具有較強的吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力，血凝反應的效果基本上與新鮮紅細胞相似。如用兩種不同醛類處理效果更佳。也可先用戊二醛，再用鞣酸處理。醛化紅細胞能耐60C的加熱，并可反復凍融不破碎，在4℃環(huán)境中可保存3-6個月，在一20℃的環(huán)境中可保存1年以上。

　　2.致敏

　　致敏用的抗原或抗體要求純度高，并保持良好的免疫活性。用蛋白質(zhì)致敏紅在低pH，低離子濃度下，用醛化紅細胞直接吸附即可。間接法則需用耦聯(lián)劑將蛋白質(zhì)結合到紅細胞上。常用耦聯(lián)劑為雙耦氮聯(lián)苯胺(bis-diazotized benzidine，BDB)和氯化鉻。前者通過共價鍵，后者通過金屬陽離子靜電作用使蛋白質(zhì)與紅細胞表面結合而達到致敏的目

　　3.血凝

　　試驗可在微量滴定板或試管中進行，將標本倍比稀釋，一般為1：64，同時設不含標本的稀釋液對照孔。在含稀釋標本1滴的板孔(或試管)中，加入0.5%致敏紅細胞懸液1滴，充分混勻，置室溫1～2h，即可觀察結果。凡紅細胞沉積于孔底，集中呈1圓點的為不凝集(一)。如紅細胞凝集，則分布于孔底周圍。根據(jù)紅細胞凝集的程度判斷陽性反應的強弱，以抖凝集的孔為滴度終點。

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