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免疫佐劑的種類
1.具備免疫原性的佐劑:如卡介苗、枯草分枝桿菌、短小棒狀桿菌、百日咳桿菌、脂多糖、細(xì)胞因子等。
2.不具備免疫原性的佐劑:如氫氧化鋁佐劑、磷酸鋁、磷酸鈣、石蠟油、羊毛脂、表面活性劑、藻酸鈣、多聚核苷酸、胞壁肽等。
應(yīng)用最多的是福氏佐劑、細(xì)胞因子佐劑。
(1)福氏佐劑:分完全福氏佐劑(石蠟油+羊毛脂+卡介苗)、不完全福氏佐劑(石蠟油+羊毛脂)兩種。福氏完全佐劑可提高佐劑效能,但注射后易產(chǎn)生局部持久性潰瘍和肉芽腫,宜注意。
(2)細(xì)胞因子佐劑:細(xì)胞因子佐劑與抗原合用,可有效激發(fā)機(jī)體的免疫功能。IL-2、IL-1、IFNγ、IL-12、GM-CSF皆較常應(yīng)用;細(xì)胞因子佐劑還被廣泛應(yīng)用于腫瘤基因治療中。
血清結(jié)合珠蛋白測定
正常范圍:火箭電泳法:1.0~2.7g/L放射免疫擴(kuò)散法:0.8~2.7g/L血紅蛋白結(jié)合法:0.3~2.0g/L檢查介紹結(jié)合珠蛋白是肝臟合成的一種糖蛋白,能與血漿中的血紅蛋白結(jié)合形成穩(wěn)定的復(fù)合物。
臨床意義:本測定主要用于反映是否發(fā)生溶血。
血清結(jié)合珠蛋白增多,見于創(chuàng)傷、腫瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、使用類固醇時、膽道梗阻、妊娠、口服避孕藥等。
血清結(jié)合珠蛋白減少,見于各種溶血、肝細(xì)胞病變、先天性無結(jié)合珠蛋白癥憾染、巨幼細(xì)胞貧血和組織中出現(xiàn)出血。
斑點(diǎn)免疫層析試驗
(一)原理
斑點(diǎn)免疫層析試驗簡稱免疫層析試驗(ICA),也以硝酸纖維素膜為載體,但利用了微孔膜的毛細(xì)血管作用,滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移,猶如層析一般。
(二)試劑和操作
免疫層析試驗以單克隆雙抗體夾心法為例。試驗所用試劑全部為干試劑,多個試劑被組合在一個約6mm×70mm的塑料板條上,成為一單一試劑條,試劑條上端(A)和下端(B)分別粘貼吸水材料,免疫金復(fù)合物干片粘貼在近下端(C)處,緊貼其上為硝酸纖維素膜條。硝酸纖維素膜條上有兩個反應(yīng)區(qū)域,測試區(qū)(T)包被有特異抗體,參照區(qū)(R)包被有抗小鼠IgG.
測定時將試紙條下端浸入液體標(biāo)本中,下端吸水材料即吸取液體向上端移動,流經(jīng)C處時使干片上的免疫金復(fù)合物復(fù)溶,并帶動其向膜條滲移。若標(biāo)本中有待測特異抗原,其時可與免疫金復(fù)合物之抗體結(jié)合,此抗原抗體復(fù)合物流至測試區(qū)即被固相抗體所獲,在膜上顯出紅色反應(yīng)線條(T)。過剩的免疫金復(fù)合物繼續(xù)前行,至參照區(qū)與固相小鼠IgG結(jié)合(免疫金復(fù)合物中的單克隆抗體為小鼠IgG),而顯出紅色質(zhì)控線條(R)。反之,陰性標(biāo)本則無反應(yīng)線條,而僅顯示質(zhì)控線條。
斑點(diǎn)免疫層析試驗在試劑形式和操作步驟上較前述的幾種免疫測定法都更為簡化,只用一個試劑,只有一步操作。
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