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2013醫(yī)學(xué)檢驗輔導(dǎo)精華:血清蛋白質(zhì)的電泳分析

  醋酸纖維薄膜(ACM)和瓊脂糖凝膠是目前最廣泛采用的兩類介質(zhì)。巴比妥緩沖液pH8.6,離子強(qiáng)度0.05,標(biāo)本用量3-5μl,標(biāo)準(zhǔn)電泳條件為CAM每厘米寬電流0.75mA,瓊脂糖約為每厘米寬10mA,電泳時間40-60分鐘,電泳前沿達(dá)6cm左右。雖然目前已開展和應(yīng)用不少個別蛋白質(zhì)的測定方法,但血漿蛋白質(zhì)電泳圖譜至今仍然是了解血漿蛋白質(zhì)全貌的有價值的方法,可用為初篩試驗,以提供較全面的信息。正常血清電泳后可以很好地分為5條區(qū)帶(Alb、α1、α2、β1、β2),新鮮標(biāo)本可以分出β帶(以C3成分為主)。由于各條區(qū)帶中各個蛋白質(zhì)組分的重疊、覆蓋(如CER常被α2MG及Hp所掩蓋),以及某些蛋白質(zhì)染色帶很淺(如脂蛋白和α1糖蛋白),可以用其它染色方法輔助。目前除了常使用的氨基黑和麗春紅染料外,還采用靈敏度更高的考馬亮藍(lán)。

  用血清蛋白質(zhì)電泳測定各組分的含量,通?刹捎酶鲄^(qū)帶的濃度百分比(%)或絕對濃度(g/L)表示之。

  用醋酸纖維薄膜電泳測得正常小兒及成人血清蛋白質(zhì)的參考值可參見表2-7。

  在疾病情況下血清蛋白質(zhì)可以出現(xiàn)多種變化。根據(jù)它們在血清蛋白質(zhì)電泳圖譜上的異常特征,不少學(xué)者曾試將其分為以下類型,參見表2-8及圖2-1。

  表2-7 各年齡組血清蛋白質(zhì)電泳正常值(X±SD)范圍

年齡 總蛋白質(zhì)(g/L) 蛋白質(zhì)各組分的濃度比(%)
白蛋白 α1 α2 β γ
臍帶血 57 69.4 2.5 5.4 7.0 15.4
±12 ±5.6 ±1.0 ±1.6 ±2.4 ±4.4
新生兒 60 64.2 3.5 14.1 9.2 6.2
±12 ±13.2 ±3.6 ±2.1 ±2.4 ±4.8
1-5歲 68 65.2 3.1 11.2 10.2 10.4
±11 ±7.8 ±1.3 ±2.7 ±2.6 ±5.5
6-12歲 69 61.7 3.0 10.5 10.2 14.7
±14 ±6.1 ±1.8 ±3.4 ±2.0 ±5.8
成人△1 64 2.8 6.6 7.2 14.4
45-78 0.8-6.2 3.4-12 4.8-14 7.0-25
2 64 2.8 5.9 9.8 17.5
55-71 0.9-4.8 2.6-9.2 6.3-13.3 12.2-22.3
3 68.7 3.1 6.0 8.2 13.8
53-76.6 1.3-5.0 2.7-9.9 5.5-14.9 8.8-21.3
4 62.2 4.2 6.6 10.2 17.33
47-77 0.7-7.6 2.4-10.8 4-16.4 8.8-25.7
5 65.7 2.28 5.7 8.8 17.5
58.8-72.7 0.7-3.8 3.6-7.8 6.3-11.3 12.3-22.7

  △資料取自不同作者:①上海醫(yī)科大學(xué)n=50;②重慶醫(yī)科大學(xué)n=123;③同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)n=132;④蘇州醫(yī)學(xué)院n=100;⑤湖南醫(yī)科大學(xué)n=100

  表2-8 異常血清蛋白質(zhì)電泳圖譜的分型及其特征

血清蛋白質(zhì)的圖譜類型 總蛋白質(zhì) Alb α1 α2 β γ
1.低蛋白血癥 ↓↓ ↓↓ N↑ N N↑
2.腎病型 ↓↓ ↓↓ ↑↑ 不定
3.肝硬化型 ↓N↑ ↓↓ N↓ N↓ β-γ↑(融合)
4.急性炎癥或急性時相反應(yīng)癥 N ↓N N
5.慢性炎癥型
6.彌漫性肝損害型 ↓N ↓↓ ↑↓
7.彌漫寬γ球蛋白血癥型 ↓N ↑↑
8.M蛋白血癥型 在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)M蛋白峰-M區(qū)帶峰
9.高α2(β)-球蛋白血癥 ↑↑
10.妊娠型(高α型) ↓N N
11.蛋白質(zhì)缺陷型 個別區(qū)帶出現(xiàn)特征性缺乏

  上述電泳圖譜分型有助于臨床疾病判斷的參考。在某些蛋白質(zhì)異常增多的情況下,可出現(xiàn)異常區(qū)帶。如高濃度的αFP可以在Alb與α1區(qū)帶間出現(xiàn)一條清晰的新帶(有人稱之為肝癌型);CRP異常增高可出現(xiàn)特殊界限的γ區(qū)帶;單核細(xì)胞白血病可出現(xiàn)由于溶菌酶異常增多的γ后區(qū)帶等;單克隆免疫球蛋白異常癥(M蛋白血癥)則在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)一條很深的界限截然的M區(qū)帶。

  在大劑量使用青霉素或水楊酸等藥物時,由于藥物與白蛋白的結(jié)合,可導(dǎo)致這部分白蛋白電泳遷移率的加快而出現(xiàn)區(qū)帶狀的改變。

  急性時相反應(yīng)型常以α1及α2區(qū)帶加深為特征;妊娠型以α1區(qū)帶增高為特征,伴有β區(qū)帶的增高;以α2區(qū)帶增高為特征的圖譜常見于風(fēng)濕病等免疫反應(yīng)性疾病。其它慢性炎癥則同時有α1、α2及γ-球蛋白的增加。在肝硬化及慢性肝炎伴肝硬化及慢性肝炎伴肝硬化可以出現(xiàn)β、γ區(qū)帶融合彌散的寬γ帶。慢性遷延型肝炎、慢性活動型肝炎及慢性反復(fù)感染可以出現(xiàn)多條γ區(qū)帶的加深。

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